Заключение
Исследовано взаимодействие амидной формы гексапептида HLDF-6 с дейтерием и тритием в реакции ВТКИО. Найдены условия реакции ВТКИО, позволяющие получить высоко меченный тритием пептид [3H]TGENHR-NH2 с высокой молярной радиоактивностью.
Проведен анализ биотрансформации пептида TGeNHR-NH2 в плазме крови и на мембранах клеток головного мозга крысы с использованием меченного тритием пептида [3H]TGENHR-NH2. В результате проведенных исследований было найдено, что амидная форма пептида HLDF-6 обладает высокой устойчивостью к гидролизу в плазме крови, значительно превосходя по этому параметру пептид, не имеющий амидной защиты С-конца пептидной цепи. Показано, что основной вклад в гидролиз пептида TGeNHR-NH2 в плазме крови вносят диаминопептидазы, при этом основными долгоживущими продуктами гидролиза пептида TGeNHR-NH2 в плазме крови являются тетрапептид ENHR-NH2 и дипептид HR- NH2. Пептид HR-NH2 является активным метаболитом, обладающим ноотропной активностью, близкой к исходному пептиду TGeNHR-NH2. Предварительная работа по поиску первичной мишени пептида TGeNHR-NH2 не позволила обнаружить специфические места связывания для [3H]TGENHR-NH2.Результаты, полученные при исследовании влияния амидной формы пептида HLDF-6 на исследовательское поведение на неинвазивной модели и при радиоли- гандном анализе нейрохимических процессов, показывают, что в механизм этих фармакологических эффектов с высокой степенью вероятности вовлечена глута- матергическая система гиппокампа, в частности, NMDA-тип рецепторов. В серии сравнительных поведенческих экспериментов продемонстрирован избирательный фармакологический эффект пептида TGENHR-NH2 на исследовательскую активность мышей Balb/c с исходным когнитивным дефицитом.
У этих же мышей был изучен рецепторный компонент механизма действия пептида. Было показано, что у мышей линии Balb/c как показатели ЭИП, так и плотность NMDA-рецепторов оказались ниже, чем у мышей линии С58Bl/6. После 5-кратного системного введения амидной формы пептида HLDF-6 в ежедневной дозе 100 мкг/кг как показатели ЭИП, так и величина плотности NMDA-рецепторов в гиппокампе мышей Balb/c значительно увеличилась, достигая высоких значений в контрольной группе (C57Bl/6), относительно которой препарат был неэффективен. Таким образом, специфическая ноотропная активность пептида связана с воздействием как минимум на глутаматергическую рецепторную систему мозга.Литература
Васильева Е.В., Золотарев Ю.А., Ковалев Г.И. Влияние ноотропных препаратов на метаботропные глутаматные рецепторы мозга мышей Balb/c и C57B1/6 // Нейрохимия. 2013. Вып. 30. № 2. С. 135-141.
Воронина Т.А., Середенин С.Б. Ноотропные и нейропротекторные средства // Экспер. и клин. фарма- кол. 2007. Вып. 70. № 4. С. 44-58.
Долотов О.В., Середенина Т.С., Левицкая Н.Г. и др. Гептапептид Семакс стимулирует экспрессию BDNF в различных отделах мозга крысы in vivo // Докл. РАН. 2003. Вып. 391. № 1. С. 131-134.
Золотарев Ю.А., Дадаян А.К., Долотов О.В. и др. Равномерно меченные тритием пептиды в исследованиях по их биодеградации in vivo и in vitro // Биоорган. химия. 2006. Вып. 32. № 2. С. 80-88.
Золотарев Ю.А., Фирстова Ю.Ю., Абаимов Д.А. и др. Меченные изотопами водорода лиганды к дофаминовым и глутаматным рецепторам MK-801 и 7-OH-DPAT // Биоорган. химия. 2009. Вып. 35. № 3. С. 323-333.
ЗолотаревЮ.А., Дадаян А.К., КозикВ.С.и др. Твердофазный изотопный обмен водорода на дейтерий и тритий в генно-инженерном инсулине человека // Биоорган. химия. 2014. Вып. 40. № 1. С. 2635.
Ковалев Г.И., Фирстова Ю.Ю. Ноотропные препараты: разные мишени - общий эффект // Клиническая фармакология и терапия. 2010. Вып. 19. № 6. С. 72-73.
Костанян И.А., Жохов С.С., Сторожева З.И. и др. Нейропротекторное действие гексапептида HLDF-6 на нейроны гиппокампа крысна модели болезни Альцгеймера in vitro и in vivo // Биоорган.
химия. 2006. Вып. 32. № 4. С. 399-407.Костанян И.А., Сторожева З.И., Семенова Н.А., Липкин В.М. Пептид HLDF-6 уменьшает когнетив- ные дисфункции и поражения мозга, вызванные хронической ишемизацией мозга крыс // Докл. РАН. 2009. Вып. 428. № 4. С. 1-5.
Сторожева З.И., Прошин А.Т., Жохов С.С. и др. Гексапептиды HLDF-6 и PEDF-6 восстанавливают память у крыс при хроническом введении пептида бета-амилоида Aв(25-35) в желудочки мозга // Бюлл. эксп. биол. и мед. 2006. Вып. 141. № 3. С. 292-296.
Фирстова Ю.Ю., Долотов О.В., Кондрахин Е.А. и др. Влияние ноотропных препаратов на уровень BDNF в гиппокампе и коре мозга мышей с различной эффективностью исследовательского поведения // Экспер. и клин. фармакол. 2009. Вып. 72. № 6. С. 3-7.
Kostanyan I.A., Astapova M. V., Starovoytova E. V., Dranitsyna S. M., Lipkin VM. A new human leukemia cell 8.2 kDa differentiation factor: Isolation and primary structure determination // FEBS Letters. 1994. Vol. 356. № 2-3. P. 327-329.
Sewell R.D., Gruden M.A., Pache D.M. et al. Is the human leukaemia differentiation factor fragment HLDF6 improve memory via brain DNA and protein synthesis // J. Psychopharmacology. 2005. Vol. 19. P. 602-608.
Zolotarev Yu.A., Dadayan A.K., Bocharov E.V et al. New development in the tritium labelling of peptides and proteins using solid-state catalytic isotopic exchange with spillover-tritium // Amino Acids. 2003. Vol. 24. № 4. P. 325-333.
Zolotarev Yu.A., Dadayan A.K., Borisov Yu.A., Kozik V.S. Solid state isotope exchange with spillover hydrogen in organic compounds // Chemical Rev. 2010. Vol. 110. P. 5425-5446.
Еще по теме Заключение:
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- Заключение
- 2.5. Рациональное трудоустройство больных по заключению КЭК
- Патоморфологическое заключение
- Вместо заключения
- Параграф пятый. Об общих заключениях по действиям мозга
- Механизмы заключения договоров
- Заключение: от понимания к действию
- Параграф одиннадцатый. Заключения по форме головы
- Параграф четвертый. Заключения по симптомам лихорадок
- Заключение
- Заключение
- Заключение