3.3. СРЕДСТВА РАЗЛИЧНЫХ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП

Самую большую группу лекарственных средств составляют пре­параты, обладающие различными фармакологическими свойствами. Именно с фармакологической активностью связаны особенности токси­кологических исследований лекарственных средств различных фарма­кологических групп.

Токсические эффекты могут быть связаны с механизмом действия препарата, которое является основным в его терапевтической эффек­тивности. Ярким примером могут служить нестероидные противовос­палительные препараты (НИВИ), патогенетическим механизмом фар­макологического действия которых является торможение биосинтеза эндогенных медиаторов воспаления, среди которых ведущая роль при­надлежит простагландинам (ИГ). Все современные НИВИ являются ин­гибиторами фермента циклооксигеназы (Ц,ОГ). В организме Ц,ОГ суще­ствует в двух формах: Ц,ОГ-1 и Ц,ОГ-2. Причем Ц,ОГ-2 контролирует патологические процессы, сопровождающиеся воспалением, а Ц,ОГ-1 -

физиологические функции, такие как микроциркуляция, цитопротекция, свертываемость крови, регенерация, тонус гладкой мускулатуры [167]. Таким образом, противовоспалительное действие НПВП реализуется посредством подавления активности ЦОГ-2, а побочное действие свя­зывают в основном с влиянием на ЦОГ-1 [57,158]. Широта терапевти­ческого действия и переносимость НПВП во многом зависят от избира­тельности их влияния на ЦОГ-2. Вековая история разработки и меди­цинского применения НПВП от АСК до мелоксикама и целекоксиба от­ражает их эволюцию: сначала в направлении эффективности, предел которой, по-видимому, уже достигнут, а в последние годы - к сниже­нию побочного действия, главным образом гастропатий. Вместе с тем разнообразие спектра терапевтической активности объясняет тот факт, что препараты, представляющие разные поколения и не всегда имею­щие достаточную широту терапевтического действия, сохраняют свое место в клинической практике в настоящее время.

Учитывая наличие корреляционной связи между противовоспа­лительной и ульцерогенной активностью, при оценке безопасности НПВП особое внимание необходимо уделять исследованию желудочно- кишечного тракта. Кроме того, в последние годы НПВП стали широко использовать в многокомпонентных препаратах, отпускаемых без ре­цепта, поэтому каждая такая композиция должна быть оценена с точки зрения ульцерогенной активности.

Так, при изучении хронической токсичности многокомпонентного препарата, содержащего ибупрофен, в сравнении с препаратом, со­держащим вместо ибупрофена напроксен, нами было показано, что в равных условиях эксперимента препарат, содержащий напроксен, ока­зывал местно-раздражающее действие на слизистую оболочку желудка, в то время как препарат сравнения такого эффекта не вызывал.

При изучении хронической токсичности диклофенака натрия на крысах была обнаружена дозозависимость по влиянию препарата на слизистую оболочку кишечника у животных вплоть до развития некроза и последующего перитонита.

После однократного введения диклофенака натрия группе крыс с по­стоянным доступом к пище и воде гибель животных наступала в тече­ние 3-5 сут. Для картины интоксикации характерно угнетение двига­тельной активности животных вплоть до адинамии, отказ от пищи. LD₅₀ составляет около 270 мг/кг (табл. 24).

Таблица 24 - Выживаемость животных, имеющих свободный доступ к корму и воде, после однократного внутрижелудочного введения дик­лофенака натрия

При вскрытии на 3-й день после однократного введения диклофенака натрия в дозах 200-500 мг/кг наблюдались патологические изменения в кишечнике, проявляющиеся в отеке, разрыхлении и гиперемии слизи­стой оболочки и наличии слизи в просвете кишечника. Дальнейшее раз­витие патологического процесса приводило к появлению перфорирую­щих язв в слизистой оболочке кишечника, развитию фиброзного или гнойно-фиброзного перитонита и гибели животных на 4-5 сут. У жи­вотных, получавших препарат в дозе 100 мг/кг, выявлены незначитель-

ные признаки отека в слизистой кишечника. Изменения в слизистой оболочке желудка, выражающиеся в небольшом отеке без признаков повреждения целостности слизистой, отмечались только после введения диклофенака натрия в дозах 400 и 500 мг/кг.

После однократного введения диклофенака натрия депривирован- ным животным визуальная оценка состояния слизистой оболочки же­лудка и кишечника у контрольных крыс не выявила каких-либо призна­ков повреждения. В группе крыс, получавших препарат в дозе 10 мг/кг, у 2 животных наблюдались гиперемия слизистой желудка и единичные точечные кровоизлияния в ней. В дозе 30 мг/кг диклофенак натрия вы­зывал слабое или умеренное повреждение слизистой оболочки желудка у всех подопытных животных. Наибольшее повреждение слизистой же­лудка в виде обширных кровоизлияний, множественных эрозий и глу­боких язв отмечали у всех животных, получавших диклофенак натрия в дозе 100 мг/кг. В слизистой оболочке кишечника изменения в виде ги­перемии и единичных кровоизлияний отмечали лишь при введении препарата в дозе 100 мг/кг. В дозе 10 и 30 мг/кг диклофенак натрия не вызывал каких-либо изменений состояния слизистой кишечника у под­опытных животных.

Сохранение свободного доступа животных к пище и воде после од­нократного введения препарата (при изучении острой токсичности), а также отсутствие дополнительного стрессового воздействия, связанного с непривычными условиями содержания в клетках без подстилки, прак­тически предотвращает ульцерогенное действие диклофенака натрия на слизистую желудка. При этом доза, вызывающая минимальные измене­ния в слизистой желудка при наличии доступа к пище, составляет около 400 мг/кг, то есть в 40 раз превышает пороговую ульцерогенную дозу (10 мг/кг) у депривированных животных.

Факторы, обеспечивающие целостность слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки, условно подразделяют на проэпителиальные, эпителиальные и постэпителиальные. НПВП обладают потенциальной способностью оказывать патологическое действие на все механизмы, обеспечивающие защиту слизистой ЖКТ. Преэпителиальные факторы связаны с продукцией эпителиальными клетками желудка слизи и би­карбоната Эпителиальный компонент определяется устойчивостью по­верхности эпителиальных клеток к обратной диффузии ионов водорода и гидрофобными свойствами слизистой желудка.

Влияние пищевого режима на выраженность ульцерогенного дейст­вия диклофенака натрия можно объяснить снижением концентрации и замедленной абсорбцией препарата в желудке. Наибольшее значение при этом имеет активное функциональное состояние слизистой, способ­ствующее действию цитопротекторных ПГ. При пищевой депривации в условиях кратковременного эксперимента (в течение 3 ч) преобладает локальное действие на слизистую желудка на эпителиальном уровне. Системные эффекты развиваются позднее и поэтому обнаруживаются при длительном наблюдении в токсикологических экспериментах. Ло­кализация ульцерогенного эффекта в области слизистой тонкого ки­шечника является следствием преимущественно системного, отсрочен­ного действия диклофенака натрия на фоне нейтрализации местных эф­фектов в слизистой желудка.

Особенности токсикологического изучения лекарственных препара­тов, обладающих гормональной активностью, заключаются, прежде всего, в наиболее тщательном изучении тех органов, в которых проис­ходит биосинтез этих гормонов. Кроме того, специфические эффекты, характерные для гормонального препарата и выявленные при изучении на здоровых животных, не должны рассматриваться как токсические в том случае, когда гормональное средство рекомендуется в качестве за­местительной терапии.

Токсикологические исследования гормональных препаратов в опы­тах на животных и экстраполяция полученных результатов на человека представляют определенные трудности.

Подтвердить вышесказанное могут результаты нашего изучения хронической токсичности дексаметазона - фторированного кортикосте­роида, обладающего глюкокортикоидной, тимолитической и противо­воспалительной активностью. Изучение токсичности дексаметазона на мышах, крысах и морских свинках показало разную чувствительность животных к препарату [41]

При длительном введении дексаметазона крысам у животных от­мечено снижение массы тела, отит, гипоплазия селезенки, атрофия ти-

муса и коры надпочечных желез. Все перечисленные изменения объяс­няются проявлением специфической активности глюкокортикоидов (влиянием на белковый обмен, иммунодепрессивной активностью, по­давлением биосинтеза кортикостероидных гормонов). Обнаруженная патология имела дозовую зависимость и была обратима после прекра­щения введения препарата.

У морских свинок не было отмечено какой-либо патологии даже при длительном введении в максимальной дозе (5 мг/кг). Такая низкая чув­ствительность морских свинок к дексаметазону объясняется видовыми особенностями и позволяет оценивать токсические свойства вещества, не связанные с гормональной активностью. Изучение кортикостероид­ных гормонов на морских свинках может иметь большое значение при оценке токсичности каких-либо включений в состав лекарственной формы.

Так, при изучении токсичности модифицированной лекарственной формы преднизолона гемисукцината в сравнении с преднизолоном для инъекций на морских свинках было показано, что пропиленгликоль, входящий в состав этой лекарственной формы преднизолона, значи­тельно усиливает местно-раздражающее действие препарата при введе­нии внутримышечно и внутривенно [3, 41, 48].

Фармакологические препараты, обладающие антиоксидантной ак­тивностью, нередко ингибируют агрегацию тромбоцитов, оказывая тем самым влияние на свертывающую систему крови Важность оценки со­стояния свертывающей системы крови в хронических ток­сикологических исследованиях трудно переоценить

При изучении токсичности антиоксиданта эмоксипина на не­скольких видах животных нами было установлено его влияние на свер­тывающую систему крови [67, 75].

У крыс эмоксипин вызывал удлинение времени свертывания крови при в/в ведении в дозе 20 мг/кг, однако никаких кровоизлияний или другой патологии во внутренних органах отмечено не было. После пре­кращения введения эмоксипина показатели свертывающей системы крови нормализовались.

У кроликов при ретробульбарном применении эмоксипин удлинял время свертывания крови, начиная с дозы 5 мг/кг. Так, у контрольных животных время свертывания Г15", у кроликов, получавших эмокси­пин, 2'19"-2'31". Показатели тромбоэластограммы свидетельствовали об увеличении времени всех стадий тромбообразования. Кровоизлия­ний во внутренних органах отмечено не было.

Имеет свою специфику и группа психотропных препаратов. При токсикологических исследованиях этих препаратов следует особое вни­мание уделять состоянию центральной нервной системы [46]. Токсич­ность психотропных препаратов может меняться при одиночном и групповом содержании животных, как в остром, так и в хроническом экспериментах [33]. Кроме того, психотропные препараты, в частности антидепрессанты и психостимуляторы, могут понижать потребление корма животными. Снижение массы тела экспериментальных животных при длительном введении таких препаратов может свидетельствовать об анорексигенной активности препаратов, а не о симптоме интоксика­ции. Это свойство психотропных препаратов необходимо учитывать, особенно в хронических токсикологических экспериментах.

Токсикологические исследования на собаках дают возможность изу­чить эту группу препаратов более тщательно, например, заметить нали­чие рвоты или каких-либо других токсических проявлений, которые не выявляются на мелких лабораторных животных [6].

Многие антидепрессанты обладают гепатотоксичностью. Поэтому при изучении токсичности новых препаратов этой группы обязательно следует обращать внимание на состояние печени [45].

Таким образом, фармакологическая активность веществ при изуче­нии их токсичности, особенно хронической, должна учитываться обяза­тельно.

Еще на одной особенности изучения безопасности фармакологи­ческих средств хотелось бы остановиться, а именно, на необходимости оценки их антибактериальной активности, хотя эти исследования и не являются обязательными в настоящее время. В последние годы очень распространенной патологией является дисбактериоз. Развитие дисбак­териоза кишечника связывают, главным образом, с применением анти­бактериальных препаратов, когда происходит гибель значительной час­ти представителей нормальной микрофлоры кишечника, чувствитель­ной к препарату, и размножение устойчивых к нему микроорганизмов, в том числе и условнопатогенных и патогенных.

Однако влиять на микроэкологию кишечника могут и фармако­логические средства, обладающие антибактериальной активностью и применяющиеся длительными курсами.

Изучение антибактериальной активности 147 различных фарма­кологических препаратов, применяющихся в медицинской практике, проведенное нами в опытах in vitro, показало, что многие из них обла­дают антимикробной активностью (табл. 25). Изучалась активность го­товых лекарственных форм препаратов в отношении S. aureus АТСС 6538-р, Вас. subtilis АТСС 6633, Е. сой 25922, Ps. auruginosa 165, Pr. vul­garis АТСС 6896, Bacteroides fragilis 323, Bacteroides distasonis 255/82, Clostridium septicum 286, Clostridium novji A 302 NCTC 2908 методом

двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде.

Почти все изученные противоопухолевые препараты оказывают ан­

тибактериальное действие (табл. 26).

Таблица 25 - Антибактериальная активность сердечно-сосудистых препаратов

Таблица 26 - Антибактериальная активность противоопухолевых препаратов

Таблица 27 - Антибактериальная активность антидепрессантов

Из этой группы лекарственных препаратов следует обратить внима­ние на тамоксифен. Хотя его антибактериальная активность невысока, но длительное применение (более 2 мес) может оказать неблагоприят­ное влияние на микроэкологию кишечника и явиться причиной разви­тия дисбактериоза. Все изученные антидепрессанты также обладают ан­тибактериальной активностью (табл. 27).

Среди остальных изученных препаратов следует обратить внимание на гемфиброзил (табл. 28).

Гемфиброзил используется длительными курсами в качестве проти- волипидемического средства, что может оказывать нежелательное воз­действие на микроэкологию кишечника [112].

Таким образом, многие фармакологические препараты, не являю­щиеся антимикробными средствами, способны подавлять рост тех или иных бактерий, что может явиться причиной развития дисбактериоза.

Совместное использование таких препаратов с антибиотиками может ускорять развитие дисбактериоза. Использование в этих случаях эубио- тиков может предотвратить нежелательные эффекты со стороны желу­дочно-кишечного тракта и улучшить переносимость фармакологиче­ских средств.

Таблица 28 - Антибактериальная активность препаратов различных фармакологических групп