Глава 4 Заключение

Несомненно, атопический дерматит остается важной медико -социальной проблемой; по данным разных авторов 15-24 %, а в некоторых экологически неблагоприятных регионах около 50% детского населения страдает этим заболеванием.

Количественный и качественный состав антимикробных пептидов представляет особый интерес и является предметом интенсивного изучения.

Антимикробные пептиды - факторы врожденного иммунитета, древнее звено иммунной защиты живых организмов и растений, существующее 2 миллиардов лет. Другое название этих соединений - эндогенные антибиотики. В последние два десятилетия активно ведутся исследования по синтезированию этих соединений in vitro, что может дать начало новой эре антибактериальных препаратов. Учитывая все возрастающую резистентность микроорганизмов к традиционным антибактериальным препаратам, синтезирование и внедрение синтетических антимикробных пептидов, по нашему мнению, является перспективным направлением научного поиска.

Участие антимикробных пептидов в реакциях воспаления к настоящему времени общепризнано; установлено, что они оказывают прямое влияние на эффекторные звенья воспалительного процесса. LL-37 индуцируют синтез

интерлейкинов (ИЛ) ИЛ-6, ИЛ-10 и хемокинов в кератиноцитах, что вызывает мобилизацию нейтрофилов, моноцитов, T-клеток и тучных клеток. Последние при воздействии LL-37 дегранулируют и высвобождают медиаторы, в том числе гистамин.

В исследованиях активности антимикробных пептидов при атопическом дерматите не раз отмечалась четкая зависимость между течением процесса, наличием вторичной инфекции и снижением уровня антимикробных пептидов как в сыворотке крови, так и в участках воспаления. Одной из составляющих повышенной чувствительности больных атопическим дерматитом к различным инфекционным агентам является недостаточная выработка антимикробных пептидов, и, в частности, кателицидина LL-37 и а-дефензинов. Этот факт рассматривается в качестве одного из центральных звеньев патогенеза атопического дерматита. Изначально предполагалось, что уровень LL-37 и а- дефензинов должен быть высоким из-за наличия механической травмы зудящей кожи. Однако при использовании количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени как при остром, так и при хроническом атопическом дерматите было выявлено значительное снижение уровней LL-37 и а-дефензинов. Данные о количестве индуцируемых антимикробных пептидов в коже больных атопическим дерматитом расходятся. Установлено, что нормальное содержание LL-37 в плазме составляет 1,2-1,8 нг/мл.

При исследовании а-дефензинов у больных с атопическим дерматитом также выявлено снижение их уровня по сравнению со здоровыми донорами. По данным

Yount N. Y. (2005), снижение уровня а-дефензинов может свидетельствовать об активном воспалительном процессе.

В нашей работе была предпринята попытка исследовать активность этих антимикробных пептидов в ротовой полости у детей с атопическим дерматитом. Известно, что основные классы антимикробных пептидов вырабатываются практически во всех биологических жидкостях организма, в том числе и в ротовой жидкости.

Для постановки экперимента были использованы наборы Human LL-37 ELISA, HNP 1-3 ELISA (Hycult Biotech, Голландия). Данные наборы предназначены для определения антимикробных пептидов в сыворотке крови и других биологических жидкостях.

В исследовании принимали участие 60 детей с атопическим дерматитом и дети без аллергических заболеваний, без пищевой аллергии. Численность основной группы (дети, страдающие атопическим дерматитом различной степени тяжести) составила 38 человек; группа сравнения - 22 человека. Все дети, участвующие в исследовании были разделены на три возрастные группы: 6-9 лет (31 ребенок), 10-12 лет (14 детей), 13-18 лет (15 человек). Был определен уровень

антимикробных полипептидов полости рта в зависимости от возраста. Статистически не было выявлено зависимости между уровнем антимикробных пептидов и возрастом детей, участвующих в исследовании.

Установлена средняя концентрация кателицидина в слюне - 1,2 нг/мл. По данным Renchuan Tao, Richard J.(2008 г.) уровень LL-37 ротовой жидкости составляет 1,72 нг/мл.

Средняя концентрация а-дефензинов слюны в нашем исследовании составила 7,19 нг/мл.

При изучении уровня антимикробных пептидов у детей с атопическим дерматитом анализ полученных результатов показал, что концентрация LL-37 в слюне оказалась достоверно ниже по сравнению с группой сравнения. Изучив это показатель в зависимости от характера течения атопического дерматита, мы выяснили, что уровень кателицидина в слюне у больных с АтД не зависел от тяжести заболевания и был достоверно ниже контрольных значений как при тяжелом (0, 7 нг/мл), так и при среденетяжелом течении АтД (0,6 нг/мл).

В ходе исследования ротовой жидкости, выявлено что уровень концентрации а-дефензинов у детей с АтД составил 6,24 нг/мл, что достоверно ниже установленных нами значений этих пептидов у детей группы сравнения (7,19 нг/мл).

При определении концентрации а-дефензинов ротовой жидкости у детей с тяжелым (6,99 нг/мл) и среднетяжелым течением атопического дерматита (6,28 нг/мл) не выявлено статистически достоверного изменения уровня а-дефензина в сравнении с детьми без атопии. Таким образом, можно предположить, что основным фактором в развитии и утяжелении атопического дерматита является кателицедин, а а-дефензины играют роль «поддержки, помощника» LL-37, своим присутствием усиливая действие этого пептида. Возможно, что концентрация а- дефензинов увеличивается по мере нарастания концентрации кателицидина и есть «критическая точка» уровня LL-37, по достижении которой дефензины

начинают принимать более активное участие в противомикробном процессе. Данное предположение требует дополнительных, более глубоких исследований.

Интересные данные были получены при изучении влияния пищевой аллергии на концентрацию кателицидина в слюне. Так, у детей с пищевой сенсибилизацией уровень кателицидина оказался достоверно ниже. Это может свидетельствовать о том, что течение атопического дерматита у детей с пищевой сенсибилизацией снижает показатели иммунологической резистентности и может способствовать генерализации кариозного процесса полости рта.

При оценке стоматологического статуса было выявлено, что 52 (86,6 %) из обследуемых детей имели кариес различной интенсивности, из них 36 (60 %) ребенка, страдающих атопическим дерматитом различной степени тяжести, 18 (30 %) детей из группы сравнения. При анализе интенсивности кариеса по индексу КПУ у детей с АтД, выявлено, что 27 (45 %) детей имели кариес средней и высокой интенсивности, 7 (11,6 %) детей - кариес низкой интенсивности.

У детей группы сравнения низкий уровень интенсивности кариеса отмечался у 5 детей. У 13 детей наблюдался высокий и средний уровень интенсивности кариеса.

Интактные зубы имели 8 из обследуемых детей, из них 4 ребенка с атопическим дерматитом средней степени тяжести и 4 - дети из группы

сравнения.

При статистической обработке четко доказано различие интенсивности кариеса у детей с основным заболеванием и детей группы сравнения.

При изучении уровня антимикробных пептидов ротовой полости выявлено, что у детей с атопическим дерматитом концентрация LL-37 и а-дефензины в слюне имела тенденцию к снижению по мере нарастания интенсивности

кариозного процесса. Это свидетельствует о достоверной зависимости концентрации LL-37 и а-дефензиов слюны от интенсивности кариозного процесса у детей, страдающих атопическим дерматитом.

Другой характер зависимости был получен в группе сравнения. Уровень кателицидина в слюне детей без атопии повышался в зависимости от интенсивности кариозного процесса и составил при низкой интенсивности кариеса 0,5 нг/мл, средней - 1,2 нг/мл и высокой - 0, 16 нг/мл. Полученные результаты подтверждают предположения о том, что у детей с атопическим дерматитом снижается иммунологическая резистентность полости рта и ведет к интенсификации кариозного процесса. Более того, высокая интенсивность кариозного процесса ведет к дополнительной сенсибилизации организма и значительно снижает показатели местного иммунитета.

При исследовании уровня а-дефензинов у детей с атопическим дерматитом также была установлена достоверная взаимосвязь концентрации этих пептидов от интенсивности кариозного процесса. У детей со средней и высокой интенсивностью кариеса концентрация а-дефензинов достоверно ниже, чем у детей с низкой интенсивностью кариеса. При изучении активности а-дефензинов ротовой полости у детей группы сравнения, напротив, статистической достоверности между концентрацией этих пептидов при различной интенсивности кариозного процесса выявленно не было. Зависимости между уровнем LL-37 и уровнем а-дефензинов в ротовой жидкости у детей группы сравнения с различной интенсивностью кариозного процесса выявлено не было (р