ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы

Инфекции, вызываемые дрожжевыми грибами, в последние годы стали одним из приоритетных вопросов ветеринарной микологии. Возрастает их распространенность среди домашних животных, выявляются новые этиоло­гические агенты, однако вопросы диагностики, терапии и профилактики дрожжевых инфекций животных остаются недостаточно изученными.

Заболевания, вызываемые дрожжевыми грибами, известны с глубокой древности. Их описание встречается уже у Гиппократа (5 век до н.э.). Роль дрожжевых грибов в этиологии инфекционных заболеваний («молочницы») была впервые продемонстрирована Langenbeck в 1839 г., и впоследствии подтверждена Berg и Gruby [15].

Термин «дрожжи» является собирательным; он объединяет виды грибов, не образующие мицелий, имеющие одноклеточное строение и размножаю­щиеся в вегетативной стадии почкованием или делением. Таксономически дрожжи относятся к отделам Ascomycota и Basidiomycota. К настоящему вре­мени известно 7 родов дрожжевых грибов, представители которых способны вызывать инфекционные заболевания человека и животных: Candida, Trichosporon, Cryptococcus, Saccharomyces, Geotrichum, Rhodotorula, Malassezia.

У животных дрожжевые грибы способны вызывать патологии различной формы - заболевания мочеполового тракта, в т.ч. приводящие к абортам у самок и бесплодию у самцов, маститы, заболевания пищеварительного тракта (стоматиты, гастриты, энтериты), поражения внутренних органов, а также кожные поражения и заболевания органов слуха [50].

Особенно проблема дрожжевых инфекций обострилась в последние 2 десятилетия. Начиная с 1980-х гг., в литературе стали появляться сообщения о возрастающем количестве дрожжевых инфекций в медицинской практике. Были описаны патогенные свойства у ряда видов грибов, ранее считавшихся

сапротрофными [93]. В последние годы самое пристальное внимание как ме­дицинскими, так и ветеринарными микологами уделяется заболеваниям че­ловека и животных, вызываемым дрожжевыми грибами рода Malassezia [126, 80,].

Таким образом, актуальность исследования обусловлена необходимо­стью изучения этиологической структуры, распространенности и клинико- эпизоотологических особенностей Malassezia-инфекций животных, что мо­жет быть достигнуто путем создания эффективного метода лабораторной ди­агностики данных заболеваний.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы изучение этиоло­гической значимости грибов рода Malassezia при кожных заболеваниях мел­ких домашних животных, оценка распространенности и этиологической структуры малассезиозов в Московском регионе и разработка рациональной схемы диагностики этих заболеваний.

Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Разработать оптимальный алгоритм выявления и количественного учета грибов рода Malassezia на покровных тканях животных.

2. В сравнительном аспекте изучить частоту всречаемости и плотность популяции грибов рода Malassezia в слуховом канале здоровых животных и больных острыми и хроническими отитами.

3. Изучить распространенность и этиологическую структуру Malassezia- инфекций среди мелких домашних животных Московского региона.

4. Изучить клинические формы и предрасполагающие факторы Malassezia-инфекций мелких домашних животных.

5. Выделить культуры возбудителей Malassezia-инфекций животных и изучить их биологические свойств (морфологические, физиологические, ви­рулентные).

6. Определить оптимальные условия поддержания и хранения культур грибов рода Malassezia.

Научная новизна.

Впервые разработан алгоритм выявления грибов рода Malassezia на по­кровных тканях животных.

Впервые получены количественные данные об изменении частоты встречаемости и плотности популяции грибов рода Malassezia в слуховом ка­нале здоровых животных и больных острыми и хроническими отитами, что демонстрирует роль этих микроорганизмов в патогенезе хронических отитов.

Впервые в РФ получены данные о широкой распространенности Malassezia-инфекций среди мелких домашних животных, систематизированы их клинические формы, выявлены предрасполагающие факторы.

Показано, что основным возбудителем Malassezia-инфекций мелких до­машних животных в РФ является вид М. pachydermatis.

Впервые выделена чистая культура эпизоотических штаммов возбудите­ля, охарактеризованы их морфологические, физиологические и вирулентные свойства.

Впервые был воспроизведен экспериментальный Malassezia-дерматит при накожном заражении собак.

Практическая значимость.

Паспортизированы этиологические штаммы М. pachydermatis №№:12803, 15003, 15503, 16103, 16903 ВГНКИ, которые хранятся в отделе

контроля качества и стандартизации лекарственных средств против микозов и микотоксикозов животных ФГУ ВГНКИ.

Разработан алгоритм, выявления грибов рода Malassezia на покровных тканях животных, одобренный на межлабораторном совещании ФГУ ВГНКИ 05.07.2007 г. и рекомендован к утверждению на Федеральном уровне.

Разработан метод диагностики поверхностных микозов животных апро­бированный в условиях ветеринарных клиник Москвы, Казани и других го­родов РФ.

В опытах на лабораторных животных при экспериментальном заражении собак изучен патогенез поверхностных микозов, вызванных этиологическими штаммами М. pachydermatis, дана оценка влияния М. pachydermatis на об­менные и иммунные процессы организма животных.

Разработаны и утверждены в установленном порядке методические ука­зания по диагностике микозов животных, вызываемых грибами рода Malassezia, которые позволяют рационализировать микологический анализ кожного покрова и слухового канала животных.

Результаты исследований используются в учебном процессе в ФГОУ ВПО МГУПБ, ФГОУ ВПО РУДН, ФГОУ ВПО УГАВМ, ФГОУ ВПО МГАВМиБ по дисциплинам: «Микробиология», «Биология и патология мел­ких домашних, лабораторных и экзотических животных».

Апробация результатов исследований. Материалы исследований из­ложены на заседаниях Учёного совета, методических комиссиях ФГУ ВГНКИ (2002-2005); Международной научной конференции молодых уче­ных «Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных» (г. Владимир, 2004); Всероссийской конференции «Лекарствен­ные средства для животных и корма. Современное состояние и перспективы» (г. Москва, 2004); IV Всероссийском конгрессе по медицинской микологии (г. Москва, 2005)

Основные положения и результаты работы, выносимые на защиту:

1. Результаты изучения клинической роли грибов рода Malassezia при кожных заболеваниях животных.

2. Метод лабораторной диагностики Malassezia-инфекций домашних животных.

3. Результаты изучения распространенности, этиологической структуры, клинико-эпизоотологических особенностей Malassezia-инфекций домашних животных.

Публикации результатов исследований. Основные результаты иссле­дований опубликованы в 7 научных работах, в т.ч. 1 статья в научном журна­ле, 6 - в сборниках научных трудов.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 165 листах машинописного текста и включает такие разделы, как введение, обзор лите­ратуры, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, сведения о практическом использовании результатов исследований, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (171 источник в т.ч. 161 иностранный) и приложения. Работа ил­люстрирована 10 таблицами и 49 рисунками.

1.