Определение основного фактора роста фибробластов в сыворотке крови
Содержание FGF-b в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с использованием стандартных тест-наборов («Biosource», Бельгия) в соответствии с прилагаемой инструкцией.
В основе определения FGF-b - твердофазный иммуноферментный метод типа «сэндвич».
Ростовой фактор, содержащийся в образцах сыворотки и стандартах, связывался с иммобилизованными в лунках планшете антителами к FGF-b. После инкубации (2 часа при комнатной температуре) и удаления избытка антител путем четырехкратной промывки добавляли биотинилированные моноклональные антитела (в виде конъюгата с биотином) и инкубировали 1 час при комнатной температуре. После удаления избытка вторых антител добавляли стрептавидин-пероксидазу, имеющую высокое сродство к биотину и связывающуюся с биотинилированными антителами с формированием сэндвич-комплекса из 4- х регентов. После третьей инкубации (30 минут) удаляли несвязавшийся фермент и добавляли субстратный раствор с хромогеном, который взаимодействовал с ферментом, образуя цветной комплекс с изменением цвета раствора на голубой. Реакция останавливалась после инкубации (30 минут при комнатной температуре) добавлением стоп-реагента при изменении цвета раствора на желтый. Интенсивность окраски раствораизмеряли с определением оптической плотности при длине волны 450 нм на фотометре «Мультискан» (Венгрия). Оптическая плотность раствора была прямо пропорциональна концентрации присутствующего в образце фактора роста. Строили калибровочную кривую, по которой находили искомые концентрации FGF-b в образцах сыворотки с учетом разведения сыворотки. Пример калибровочной кривой для определения FGF-b представлен на рисунке 3.1.
Рис. 3.1. Образец калибровочной кривой для определения содержания FGF-b.
Минимальная достоверно определяемая концентрация FGF-b не превышала 7 пг/мл.
У 10 здоровых добровольцев сывороточная концентрация FGF-b составила 15,8±3,3 пг/мл.
3.1.
Еще по теме Определение основного фактора роста фибробластов в сыворотке крови:
- Содержание основного фактора роста фибробластов в сыворотке крови при недифференцированной дисплазии соединительной ткани
- Фибробласты и факторы роста фибробластов при ДСТ
- Определение фактора некроза опухоли а, интерферона у и интерлейкина-1 р в сыворотке крови
- Определение экспрессии растворимой сосудисто-клеточной адгезивной молекулы типа 1 - sVCAM-І в сыворотке крови Определени
- Морфологические маркеры злокачественного роста в сыворотке крови больных раком гортани в зависимости от стадии заболевания.
- Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови
- Определение общей антиоксидантной ёмкости сыворотки крови
- Методика определения содержания ацилгидроперекисей липидов в сыворотке крови
- Содержание VEGF в сыворотке крови в основных группах.
- Определение концентрации белка A-SAA и CA125 в сыворотках крови методом иммуноферментного анализа
- Определение уровня свободных цитокинов в сыворотках/плазме крови и супернатантах МЛПК
- Хроматографический метод определения метаболитов метанола и формальдегида в биологических средах (в сыворотке крови и моче)
- Твердофазный иммуноферментный анализ (enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) для определения уровня IL-10, IL -6, IL- 8, IL-1B, IFN-y, TNF-a в сыворотке крови
- 6.2. Мембранотоксическая активность неоплазмы как патогенетический фактор изменения клеток крови и опухолевого роста
- Влияние КагОББО-инозина на содержание цитокинов, состояние рецепторов к эпидермальному фактору роста и активность митогенактивируемой протеинкиназной системы в периферической крови белых беспородных крыс с химиолучевым оральным мукозитом
- Ангиогенные факторы роста как фактор риска развития осложнений при беременности
-
Акушерство и гинекология -
Анатомия -
Андрология -
Биология -
Болезни уха, горла и носа -
Валеология -
Ветеринария -
Внутренние болезни -
Военно-полевая медицина -
Восстановительная медицина -
Гастроэнтерология и гепатология -
Гематология -
Геронтология, гериатрия -
Гигиена и санэпидконтроль -
Дерматология -
Диетология -
Здравоохранение -
Иммунология и аллергология -
Интенсивная терапия, анестезиология и реанимация -
Инфекционные заболевания -
Информационные технологии в медицине -
История медицины -
Кардиология -
Клинические методы диагностики -
Кожные и венерические болезни -
Комплементарная медицина -
Лучевая диагностика, лучевая терапия -
Маммология -
Медицина катастроф -
Медицинская паразитология -
Медицинская этика -
Медицинские приборы -
Медицинское право -
Наследственные болезни -
Неврология и нейрохирургия -
Нефрология -
Онкология -
Организация системы здравоохранения -
Оториноларингология -
Офтальмология -
Патофизиология -
Педиатрия -
Приборы медицинского назначения -
Психиатрия -
Психология -
Пульмонология -
Стоматология -
Судебная медицина -
Токсикология -
Травматология -
Фармакология и фармацевтика -
Физиология -
Фтизиатрия -
Хирургия -
Эмбриология и гистология -
Эпидемиология -