ГЛАВА 16. ВИРУСЫ ГРИППА

На примере гриппа наглядно иллюстрируется ранее вы­сказанное соображение о том, что эволюция структур PHK происходит в миллион раз быстрее, чем структур ДНК. Действительно, за 10 лет эволюция вирусов гриппа проделы­вает такой же, если не больший путь, какой прошла эволю­ция приматов за 10 млн лет, завершившаяся становлением человека.

Вирусы гриппа [Orthomyxovlridac')образуют два рода; Influenzavirus(вирусы гриппа А и В) и род вируса гриппа С. Известны также ортомиксовирусы, выделенные от членис­тоногих, которые не классифицированы. Вирионы имеют сферическую (в нативных препаратах нередко нитеобразную и неправильную) форму, диаметр 80—120 нм. Нуклеокапсид представляет собой туго свернутую спираль диаметром- 7нм, длиной 50—130; нм для разных 8 его фрагментов. Он окру­жен внутренней мембраной (матриксом), образуя сердцеви­ну вириона. Наружная липидная оболочка содержит триме­ры гемагглютинина и тетрамеры нейраминидазы — поверх­ностных гликопротеидов. Молекулы гемагглютинина имеют длину 14 нм, диаметр 4 нм. Молекулы нейраминидазы имеют головку размером 4?8,5 нм и стебель размером 10?4 нм.

Геном вирусов гриппа состоит из 8 сегментов одноните- вой PHK с негативной полярностью и размерами; PBl — 2341 нуклеотид, РВ2 —2341, РА —2233, НА —1778, NP- 1565, NA—1413, M —1027 и NS —890 нуклеотидов. Число нуклеотидов и молекулярная масса их колеблются у разных штаммов вирусов и существенно различаются у вирусов А и В.

60 000 (NP), 48 000 — 63000 (NA);субъединицы гемагглю­тинина (в скобках указана дополнительная молекулярная масса углеводов)—36 000 (11 500) и 27 000 (1300). Два гена кодируют по два белка: Ml (27 000) и М2 (15000), NSI (25000) и NS2 (12 000). Естественно, что у разных вирусов эти величины варьируют.

Таблица 8. Сегменты генома и белки вируса гриппа А

Таким образом, 8 фрагментов PHK кодируют синтез 10 белков (табл. 8) [Жилинская И. H., 1983; McCouley Y., Mahy В., 1983J.

Все гены вирусов гриппа неоднократно секвенированы, а для гемагглютинина и нейраминидазы получены модели трехмерных структур. Данные о нуклеотидных последова­тельностях приведены в ряде работ, посвященных изучению генов полимеразного комплекса [Winter G., Fields S., 1982; Fields S., Winter G., 1983], гемагглютинина [Hauptmann R. et al., 1983], нуклеопротеида [Steuler H. et al., 1985], нейра­минидазы [Fields S. et al., 1981], мембранного [Winter G., Fields S., 1980] и неструктурного [Lamb R. et al., 1980] бел­ков.,

Трехмерная структура молекулы гемагглютинина оказа­лась сложной (рис. 24) [Wilson Y. et al., 1981; Wiley D. et al., ■ 1981]. Как видно из рис. 24, две антигенные детерминанты размещены по бокам рецепторного мешка, первая из них является петлей (аминокислотные остатки 140—146), вто­рая— спиралью (остатки 187—196), третья находится у ос­нования глобулярной части молекулы гемагглютинина в области дисульфидной связи аминокислотных остатков Cys 52 — Cys 277, и наконец, четвертая образуется на стадии глобулярных структур. Мутации в этих сайтах и обеспечива­ют антигенный дрейф гемагглютинина. Гликозилирование происходит также в строго определенных местах. Естествен­но, антигенные сайты гемаглютининов различных серогрупп расположены по-разному.

Рис. 24. Структура тримера гемаг­глютинина.

cho —сайты прикрепления углеводных цепочек, Ab site — антигенные сайты Прерывистая линия указывает гидро­фобный пептид, отщепляемый бром- лайном.

который играет важную роль в проникновении вирионов в клетку [Atassi M., Webster R., 1983].

Аналогичные исследования нейраминидазы [Varghese J. et al., 1983; Colman P. et al., 1983] показали, что этот глико- протеид является тетрамером с глобулярной частью, напо­минает четырехлепестковый цветок, погруженный тонким стеблем в липидный бислой внешней оболочки. В центре каждого Лепестка находится активный центр «фермента, два антигенных сайта расположены вблизи него и два — в неко­тором отдалении. C антителами взаимодействуют 7 сегмен­тов.

Проникновение вирионов в восприимчивые клетки проис-. ходит после прикрепления к рецепторам. При OTOM не только разные типы ортомиксовирусов (соответственно А, В и С) имеют различные рецепторы, но они отличаются у вирусов гриппа А человека и животных [Rogers G., Paulson J., 1983]. Это обусловлено разным составом сиалоолигосахаридов и ли­пидных компонентов клеточных мембран, а также соответст­венно разной конформацией «рецепторного кармана» моле­кулы гемагглютинина. Прикрепление к рецепторам клеточ­ных мембран происходит путем взаимодействия с ними этого «рецепторного кармана», образуется эндоцитарная вакуоль, и вирионы оказываются внутри клетки. Здесь завершается

Рис. 25. Модель функционирования, взаимодействия и движения трех бел­ков Pна начальных стадиях синтеза мРНК вируса гриппа. Последователь­ности вРНК и мРНК относятся к гену NP.Верхняя часть показывает свя­зывание РВ2 с кэп-клеточной PHK и нарезание в месте пурина (обычно А), затем PBlкатализирует продолжение затравки на матрице вРНК.

Рис. 26. Структура трех мРНК 7-го гена вируса гриппа типа А. Тонкими- линиями обозначены некодирующие области, изогнутыми — интроны. На­чальная структура — кэп-затравка клеточного происхождения.

частичная депротеинизация вириона и его сердцевина тран­спортируется к ядру. На ядерной оболочке происходит вто­рой этап депротеинизации — удаление белка М, и в ядро проникает функционально активный нуклеокапсид (рибону­клеопротеид).

Здесь же начинается транскрипция генов, в которой уча­ствует полимеразный комплекс (белки РА, PBl—РВ2) вмес­те с белком NP(рис. 25). Вирус индуцирует синтез и про­цессинг клеточных мРНК, от молекул которых белок РВ2 «откусывает» кэп-структуру- и прилегающие 10—13 нуклео­тидов.. Они и являются праймером для синтеза мРНД. Мат­ричная PHK транспортируется в цитоплазму и кодирует син­тез соответствующего белка на рибосомах.

Транскрипция -фрагментов генома происходит своеобраз­но. В.отличие от их репликации, когда синтезируется полная комплементарная нить, а затем дочерние нити каждого фрагмента, при транскрипции синтезируется лишь кодирую­щая часть нити. При этом белки полимеразного комплекса и NPмигрируют в ядро [Briedis D. et al., 1981], где форми­руются дочерние рибонуклеопротеиды [Davey J. et. al., 1985]. .При транскрипции сегментов 7 и 8 (соответственно Mи NS),как уже упоминалось, образуется по два белка (рис,, 26). Формирование вирусных частиц происходит на клеточных мембранах, в которые встроены гемагглютинины и нейраминидаза,, а выход из клетки — путем типичного-для оболочечных вирусов механизма почкования.

Для понимания происхождения вирусов гриппа их следу­ет рассматривать вместе с другими вирусами с негативно­полярным геномом: парамиксо-, рабдо-, бунья- и аренавиру­сами. Все они, за исключением -рабдовирусов, поражают теплокровных животных, многие переносятся кровососущими

членистоногими.

При репликации, которая происходит также в ядрах кле­ток, транскрибируется вся нить сегмента РНК, причем сна­чала образуется плюс-нить, а затем на матрице — минус-ни- ти дочерних РНК.

Грипп представляет собой уникальную инфекцию, не имеющую аналогов среди других инфекционных болезней. Ежегодно с наступлением холодов начинается рост заболева­

емости. Число возбудителей приближается к 200. Среди них — адено-, парамиксо-, корона-, рино-, рео- и энтерови­русы, микоплазмы, хламидии, стрептококки, стафилококки, пневмококки и др. На этом «фоновом шуме» обычно в де­кабре, но иногда раньше (ноябрь) или позже (январь, фев­раль) возникают эпидемии гриппа, охватывающие от 6—8% до 30—35% населения города в течение 3—4 нед, страны — в течение 1¹∕₂— 2 мес и полушария — в течение 2—3 мес. В настоящее время эпидемии гриппа возникают почти еже­годно, перекатываясь, подобно гигантской волне, из север­ного полушария в южное (май — август) из южного — в се­верное (ноябрь — февраль). В настоящее время грипп яв­ляется подлинно глобальной инфекцией не только 'потому, что он распространен во всех странах, но главным образом и потому, что это — инфекция человечества в целом.

Причиной такой своеобразной эпидемиологии гриппа яв­ляется уникальная изменчивость поверхностных антигенов- вируса — гемагглютинина и нейраминидазы, с которыми свя­зан иммунитет к гриппу. Такая изменчивость в свою очередь во многом зависит от фрагментарности генома вируса гриппа.

Известны 3 серологических варианта вирусов гриппа: А, В и С. Из них только вирус гриппа А имеет пандемичес­кое распространение. Вирус гриппа В вызывает более огра­ниченные эпидемии, вирус' гриппа C — спорадические забо­левания. Все дальнейшее изложение будет относиться к ви­русу гриппа А, и лишь вкратце будет обсуждаться вопрос о возможном происхождении вируса гриппа В и С. Фактичес­кий материал о гриппе можно найти в монографиях и ру­ководствах [Жданов В. М. и др., 1957; Жданов В. M.., Гайда- мович С. Я., 1982].

Об иммунитете при гриппе еще недавно существовали противоречивые мнения. C одной стороны, частая повторная заболеваемость гриппом и почти ежегодное повторение эпи­демий, вызванных одним и тем же типом вируса, как будто свидетельствовали б непрочности приобретенного иммуните­та. C другой стороны, уже давно был известен «феномен первородного антигенного греха» при гриппе — пожизненное сохранение иммунологической доминанты к серологическому варианту вируса, с которым произошла первая «встреча» в раннем детстве. Как будет показано ниже, на основании изучения этого феномена удалось установить этиологию эпидемий гриппа, которые имели место в прошлом, до от­крытия вируса гриппа в 1933 г. Окончательный вывод о прочности приобретенного иммунитета позволили сделать наблюдения 1977—1978 гг., когда после 20-летнего отсутст­вия «вернулся» вирус гриппа A (HlNl).Возникшая эпиде­

мическая волна охватила почти исключительно лиц моложе 20 лет. Таким образом, иммунитет к гриппу достаточно про­чен, и не его «слабость», а необычайная, не имеющая анало­гов среди других вирусов изменчивость вируса гриппа явля­ется причиной повторных заболеваний и эпидемий.

Эти изменения бывают двух видов: антигенные шифты, когда появляется вирус с новыми антигенами гемагглютини­на и(или) нейраминидазы, и антигенный дрейф, при кото­ром постепенно изменяется антигенная структура гемагглю­тинина и нейраминидазы. Антигенные шифты происходили несколько раз и каждый раз сопровождались пандемическим распространением гриппа. В 1918 г. появился вирус «испанс­кого» гриппа (HlNl),вызвав наиболее опустошительную пандемию, унесшую за l¹∕2 года около 20 млн жизней. Ни­когда до и после этого заболевания гриппом не сопровожда­лись такой высокой смертностью. В 1957 г. возник новый, «азиатский» вирус гриппа (H2N2),который начал стреми­тельно распространяться, вызвав пандемию, поразившую около 2 млрд человек. Перед его появлением «исчез» его предшественник (вирус HlNl),перестав циркулировать сре­ди населения. Новый, «гонконгский» вирус (H3N2)появился через 11 лет и вызвал пандемическую «волну», поразившую около 1,5 млрд человек; одновременно перестал циркулиро­вать его предшественник (вирус H2N2).В 1977 г., как уже указывалось, возвратился вирус HlNlи распространился по всему земному шару. Хотя эпидемия, вызванная этим виру- сохм (как и все предшествовавшие эпидемии), началась в Китае, вирус получил название СССР/1977, поскольку он был впервые идентифицирован советскими учеными, когда эпи­демия гриппа была занесена в СССР из Китая через Япо­нию. В отличие от предыдущих шифтов на этот раз вирус H3N2не перестал циркулировать среди населения и оба ви­руса циркулируют и в настоящее время (1988 г.), ежегодно вызывая эпидемические «волны».

Начав циркулировать среди населения, новый «шифто- вый» вирус претерпевает постепенные изменения антигенной структуры, которые называются антигенным дрейфом. Этот дрейф может быть весьма выраженным. Так, вирус HlNl, появившийся в 1918 г., в течение^ЗЭ лет, проделал настолько выраженный дрейф, что исходные по старой номенклатуре (HswlNl)промежуточные (HONl)и конечные (HlNl)его члены считались шифтовыми вариантами. Вирусы гонконг­ского ряда проделали примерно такую же эволюцию за 11— 12 лет (табл. 9), что свидетельствует о более выраженном прессе коллективного иммунитета, лежащего на основе от­бора мутантов вируса с измененной антигенной структурой, чем это было 50 лет назад. В табл. 9 показаны титры сыво-

∏p и м еч а ни е. Приведены обратные значення титров.

роток, нейтрализующие соответствующие вирусы, выделен- ные с 1968 по 1981 г. Как видно, -сыворотки .против исход­ных вирусов не нейтрализуют конечные вирусы соответству­ющих рядов и то же происходит с сыворотками против ко­нечных вирусов, которые не реагируют с исходными виру­сами.

Секвенирование генов Mи NSвирусов гриппа свиней А (swine) Iowa 15∣30и человека A∣PR 8/34 с общей антиген­ной формулой HlNlи оценка скорости эволюции (замен нуклеотидов) позволили экстраполировать время появления общего предшественника между 1915 и 1920 гг., что совпада­ет со, временем пандемии 1918 г. [Nakajima К. et al., 1984].

Если причины антигенного дрейфа более или менее по­нятны, механизмы антигенных шифтов стали проясняться после того, как были изучены многочисленные вирусы грип­па животных, которые вое принадлежат к группе вируса А. Эти вирусы были выделены от домашних животных (свиньи, лошади, .верблюды, телята, куры), многочисленных видов диких млекопитающих и особенно птиц. В последние годы их также изолировали из открытых водоемов. Ранее вирусы животных обозначались соответствующими индексами — Sw(свиньи), eq(лошади), aυ(птицы), но поскольку все ви­русы человека также были выделены от животных, новая номенклатура вирусов (точнее гемагглютинина и нейрами­нидазы) предусматривает сплошную нумерацию без обозна­чения их происхождения — от человека или животных (табл. 10) [World Health Organization, 1980].

Ясно, что в биосфере идет интенсивный обмен между ви- . русами гриппа А, циркулирующими среди животных и лю­дей. В то же время результаты серологических исследований показали, что прекращение циркуляции «исчезающих» виру­сов означает полный исход их из человеческой популяции и весьма часто выход в животную популяцию. Так, в част­ности, случилось с вирусом «испанского» гриппа, сохранив-

Таблица 10. Номенклатура подтипов гемагглютининов и нейраминидаз- вирусов гриппа А

шегося среди свиней (отсюда прежнее его обозначение HswlNl).

Уже отмечалось, что вирусы гриппа имеют фрагментар­ный геном, а это в свою очередь лежит в основе феномена рекомбинации, ,или пересортировки, генов при заражении клетки двумя разными вирусами. Например, если заразить клетки или куриные эмбрионы двумя вирусами с антигенными формулами HlNlи H3N2,то в потомстве появляются не только исходные родительские вирусы HlNlи H3N2,но и их рекомбинанты H1N2и H3N1.Рекомбинанты между всеми вирусами гриппа человека и животных не только легко вое* производятся в эксперименте, но и широко распространены в. природе. Так, после появления вируса HlNlв 1977 г. в тече­ние 2 лет были обнаружены рекомбинанты (реассортанты) между ним и вирусом H3N2,в частности, вирусы, содержав­шие гены НА, NA, Mи NSвируса HlNlи гены Pl, Р2, РЗ и NPвируса H3N2.В нескольких случаях были даже выделены рекомбинанты с антигенной формулой H3N1.Важно также отметить, что «эволюция» гемагглютинина в 1950—1957 гг. и 1977—1983 гг. шла совершенно разными путями [Raymond F. et al., 1986], хотя исходным в обоих случаях был один и тот же ген.

Как указывалось, вирус «гонконгского» гриппа появился в 1968 г. За 5 лет до этого от уток на Украине и от лошадей в штате Майами были выделены вирусы, содержащие антиге­ны НЗ (по номенклатуре 1971 г. антигены Haυ7и Heq2). Анализ с применением современных методов исследования (секвенирование генов, моноклональные антитела, олигопеп­тидное картирование и др.) позволил установить большое

сходство антигенов НЗ и Haυ7(при секвенировании генов)» НЗ и Heq2(при использовании .моноклональных антител). Если учесть, что эти вирусы были выделены в 1963 г., т. е. за 5 лет до появления вируса «гонконгского» гриппа, то с боль­шой долей вероятности можно заключить, что источником по­явления новых шифт-вариантов являются процессы рекомби­нации генов вирусов гриппа человека и животных. И даже вирус СССР/1977, который по антигенным свойствам наиболее близок к вирусам, циркулировавшим в 50-х годах (штамм A∣Fort WarrenZbO), оказался близким к этому вирусу, а 8-й (Af) —совершенно отличным.

Была исследована молекулярная эволюция вирусов гриппа Cв период между 1947 и 1983 гг. Эволюция генов NSи НА оказалась разной и независимой, что свидетельствует о пере­сортировке генов в эпидемическом процессе. По сравнению с вирусами гриппа А у вирусов гриппа Cчастота замен нуклео­тидов в гене NSбыла большей [Buonagurio D. et al., 1986]. При сравнительном исследовании генов NSвируса гриппа и VPlвируса полиомиелита было показано, что у первого час­тота мутаций равнялась l,5?10^-5, а у второго менее 2,1 X XlO^-6. Таким образом высокая частота мутаций у вируса гриппа может быть причиной его быстрой эволюции [ParvinJ. •et al., 1986].

Характер мутаций отличается тем^ что доминирующие штаммы являются не этапами «столбовой дороги», а вариан­тами разветвленной изменчивости, при которой их предшест­венники могут быть утеряны, создавая впечатление магист­рального пути эволюции.

Изучение генов вирусов гриппа, выделенных от человека и животных методами олигопептидного и олигонуклеотидного картирования и секвенирования нуклеиновых кислот, позволи- .ло, во-первых, заключить, что эти вирусы представляют собой единую, хотя и крайне гетерогенную популяцию вирусов с за­щищенным генофондом (способность к пересортировке генов); во-вторых, построить генеалогическое древо для генов гемаг­глютинина. Эти гены образуют две подгруппы. В одну из них входят гены Hlи Н2 и 6 других генов вирусов гриппа, выделенных от птиц; в другую — гены НЗ и 3 других гена вирусов гриппа, также выделенных от птиц [Air G., 1981]. Дивергенция между этими двумя группами произошла, по- видимому, давно, и в то же время гены вирусов гриппа чело­века остаются близкими ко многим генам вирусов гриппа птиц (рис. 27). На рис. 28 представлены результаты более подробного анализа вариантов гемагглютинина вируса гриппа A [Webster R. et al., 1982]. Эта дендрограмма показывает ■различие даже в пределах субтипов гемагглютинина, подтвер­ждая сложность эволюции «укоренившегося'» штамма НЗ.

Рис. 27. Дендограмма эволюционных связей гемагглютининов вирусов грип­па типа А. По оси абсцисс — относительные величины.

Итак, можно предположить, что источником происхожде­ния вирусов гриппа человека являются вирусы гриппа птиц. У птиц грипп протекает как кишечная инфекция, вирус раз­множается в слизистой оболочке кишечника, нередко вызыва­ет септический процесс и передается алиментарным путем че­рез содержимое клоаки. Циркуляция вирусов гриппа птиц осуществляется особенно интенсивно у перелетных колони­альных видов, в силу обмена разными вирусами может про­исходить и интенсивная рекомбинация. В эпизоотический про­цесс могут вовлекаться и млекопитающие. Так, в 1980 г. на атлантическом побережье Северной Америки было обнаруже­но несколько сотен трупов тюленей, погибших от заражения вирусом гриппа птиц, который для птиц был маловирулентен. Не так ли произошло в 1918 г., когда маловирулентный для животных рекомбинант оказался губительным для человека? И может быть знаменитая «английская потница» XVIII в. была также аналогом смертельного гриппа для тюленей или «испанского» гриппа для людей? К сожалению, об этом мож­но лишь догадываться.

В эпизоотический процесс гриппа диких птиц нередко во­влекается и домашняя птица. Показательны результаты ис­следования пекинских уток, экспортируемых в Гонконг из КНР. Было выделено несколько сотен штаммов вирусов грип­па А почти всех известных вирусов гриппа, а также вирусов с ранее неизвестными антигенными формулами.

Рис. 28. Взаимоотношения штаммов подтипа Гонконг в зависимости от минимальных мутационных расстоя­ний между кодирующими областями HAl.Число мутаций определяется по отношению к расстоянию NT68-BK∏9 (73 мутации).

Надо полагать, что грипп человека стал формироваться как антропоноз с момента об­разования крупных поселений и развития миграционных про­цессов. Как для многих дру­гих антропонозов, формирова­ние гриппа человека сопро­вождалось переменой меха­низма передачи заразного на­чала: грипп сразу становился инфекцией с воздушно-капель­ным путем передачи. Вероят­но, местом формирования его явилась Юго-Восточная Азия, так как все известные панлемг

с 1889 г. начинались в Ки­тае. Здесь на сравнительно ограниченной территории прожи­вает более трети человечества, через Юго-Восточную Азию пролегают миграционные пути колониальных перелетных птиц, здесь они контактируют с домашними птицами и мле­копитающими и здесь, наконец, белковое голодание повыша­ет восприимчивость организма людей к вирусам гриппа.

Ставши антропонозной инфекцией, грипп человека типа А не «оторвался» окончательно от природных резервуаров, и каждая большая эпидемия гриппа, особенно в наше время, когда численность населения земного шара превысила 4 млрд человек, сопровождается массивным выбросом части вирусной популяции в популяции домашних и диких животных. Здесь вирус «консервируется» (по антигенной структуре) вследст­вие отсутствия давления коллективного иммунитета, который не формируется в пестрых биоценозах животных и в то же время подвергается постоянным рекомбинациям. В результате этого могут возникнуть такие сочетания генов, которые дела­ют возможной реинтродукцию вируса в человеческую популя­цию. Это и лежит в основе шифтов и следующих за ними пандемий.

Что касается вирусов гриппа В, то данные молекулярно­биологического анализа показывают около 30% гомологии (табл. 11) его генома с геномом вируса гриппа A [Kemdiri- mea A., 1986J. В отличие от последнего у вируса гриппа В

Таблица 11. Гомология разных генов вирусов гриппа А и В

снизилась способность заражать животных, а следовательно, вирус потерял источники шифтов, сохранив способность к дрейфу антигенов. Этим, вероятно, объясняются более уме­ренное его распространение и отсутствие пандемий, вызван­ных этим вирусом. О происхождении вируса гриппа Cтрудно что-либо сказать, тем более что дискутируется вопрос о при­надлежности его к ортомиксовирусам, к которым относятся вирусы гриппа А и В.

Здравоохранение в настоящее время вооружено’ многими средствами борьбы с гриппом — вакцинами, препаратами им­муноглобулинов, химиотерапевтическими средствами (реман­тадин, виразол), интерфероном и его индукторами, а также антибиотиками, применяемыми для лечения и профилактики бактериальных осложнений. Тем не менее применение всех этих средств не обеспечивает радикальной профилактики гриппа и инфекция пока остается неконтролируемой. Можно предположить два возможных пути радикального решения проблемы: либо создание универсальной антигриппозной вак­цины, либо получение комплекса химиотерапевтических ве­ществ, обеспечивающих не только эффективное лечение, но и ликвидацию инфекционного начала, а следовательно, и лик­видацию источников инфекции. Универсальная антигриппоз- ная вакцина должна содержать не только дрейф-варианты вирусов, циркулировавших среди людей ранее (HlN 1, H2N2 и H3N2),но и детерминанты известных вирусов гриппа жи­вотных и возможные будущие антигенные детерминанты. Объем предстоящей работы огромен и его выполнение по­требует не одно десятилетие. Такая вакцина должна быть создана генно-инженерными методами. Не меньший путь придется пройти, прежде чем будет создан универсальный набор химиотерапевтических веществ. Но может случиться

и другое — будет найдено неожиданное и необычное решение проблемы, как это произошло в случае с полиомиелитом в начале 50-х годов, когда была разработана техника одно­слойных культур тканей, сделавшая возможным культивиро­вание вирусов полиомиелита и получение инактивированных и живых вакцин. Пока же этого нет, следует продолжать выполнять громадный объем работы для того, чтобы найти решение традиционными путями (вакцины, химиотерапия). И решению этой труднейшей проблемы не помогут ни ад­министративное нетерпение, ни волюнтаристские наскоки. Впереди много труда и терпения.

В заключение — несколько слов об ортомиксовирусах, выделенных от клещей [Львов Д. К., 1982; Clerk J. et al., 1983]. Как и вирусы гриппа, они имеют 7—8 сегментов РНК, их З'-конец имеет характерные последовательности UGGUUG ^vHJUGUUG..., общая молекулярная масса генома такая же, как и у вирусов гриппа. Более того, даже белки имеют сходную молекулярную массу. Мы слишком мало знаем о них, чтобы пытаться понять их происхождение и связь C классическими ортомиксовирусами. Широкое распростране­ние вирусов гриппа среди теплокровных животных, особенно птиц, делает вполне возможным включение клещей в цир­куляцию этих вирусов. Вирус Thogoto,выделенный от кле­щей в Африке, Азии и Европе, сходен с ортомиксовирусами. Его геном содержит 7 сегментов однонитевой РНК. C ним сходен вирус, выделенный в Португалии. При введении мы­шам он вызывает поражения в легких, сходные с поражения­ми при вирусном гриппе [Filipe А., 1986].