Культура ЭК аорты человека

В результате проведенного анализа организации эндотелия в зонах с различной предрасположенностью к атеросклерозу, визуально "нормальных” участках и областях атеросклеротических поражений был выявлен целый ряд изменений, способных иметь прямое или опосредованное отношение к процессам атерогенеза.

Единственным, на сегодняшний день, методом, позволяющим исследовать живые ЭК человека, является культура клеток in vitro. Причем, в случае гетерогенного эндотелия человека, к этой культуре предъявляются более высокие требования, что связано с необходимостью получения максимально репрезентативных клеточных популяций. Последнее требование стало выполнимым в результате использования для выделения клеток нейтральной протеазы из В. Poly ту ха, выпускаемой рядом фирм под названием Диспаза. Применение данного фермента позволило снимать с поверхности сосуда практически все ЭК при минимальной контаминации суспензии клетками из более глубоких слоев интимы (подробности в разделе "Материалы и Методы"). Наряду с высокой жизнеспособностью и эффективностью прикрепления, это позволило получить высоко репрезентативные культуры эндотелия магистральных артериальных сосудов человека. При этом первичные культуры ЭК сохранили не только количественные соотношения клеточных популяций, характерные для эндотелия этих сосудов in situ, но и некоторые морфологические особенности монослоя. Доказательством эндотелиальной природы получаемых культур является: контактное ингибирование пролиферации; способность формировать серебрящийся монослой, в котором клетки соединяются при помощи плотных и щелевых контактов; наличие в цитоплазме клеток (как одноядерных, так и многоядерных) специфических маркеров - фактора фон Виллебранда и телец Вейбеля-Паладе.

2.1.