«Формалиновая» модель хронических болевых синдромов воспалительного происхождения

Крысам в вибриссную подушку вводили 50 микролитров 5% раствора формалина. Контрольной группе крыс вместо формалина в вибриссную площадку вводили физиологический раствор. Каждую крысу тестировали только один раз.

Одновременно с видеозаписью, которую осуществляли для контроля результатов экспериментов, поведение животного оценивал один из пяти независимых наблюдателей, незнакомых с фармакологическим воздействием на животное. Регистрировали следующие элементы поведения: касания зоны инъекции (груминг), атаксию, стереотипные движения головы. Данные заносили в компьютер с использованием программы Noldus Observer (версия 3.0). Груминг зоны инъекции формалина считается наиболее очевидным поведенческим ответом на болевую стимуляции этой зоны (Tjolsen et al., 1992).

За 30 мин до введения формалина животным (N=8) внутрибрюшинно вводили раствор исследуемого антагониста NMDA-рецепторов. Были протестированы следующие вещества и их дозы: дизоцилпин (0,03, 0,1, 0,3 мг/кг), D-CPPene (0,3, 1,0, 3,0, 5,6 мг/кг), мемантин (1, 3, 10 мг/кг), нерамексан (1, 3, 10 мг/кг), MRZ 2/600 (5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/601 (5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/615 (2,5, 5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/623 (2,5, 5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/632 (2,5, 5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/633 (2,5, 5, 10, 20 мг/кг), MRZ 2/640 (1, 3, 10, 30 мг/кг) или физиологический раствор (N=20 для всех веществ, кроме D-CPPene - N=8; MRZ 2/600 и MRZ 2/60 - N=24).

Предварительный анализ данных, проведенный с помощью программой Noldus Observer, позволял представить данные в виде частот и длительностей (в секундах) каждого поведенческого элемента суммарно за каждые две минуты 60-минутного теста. В дальнейшем эти данные обобщали за 6-ти минутные интервалы. Шестиминутные интервалы были выбраны на основании предыдущих работ, в которых были показаны две фазы груминга, вызванного формалином. Первая фаза длится в течение первых 6 минут, а вторая начинается через 12 минут после инъекции формалина и длится около 50 минут (Eisenberg et al., 1993). Для удобства анализа оценивали суммарные показатели: общую длительность груминга, количество серий груминга в первую и вторую фазу.

Второй метод анализа был построен на альтернативном учете данных. Сравнивали количество животных с подавлением поведенческой реакции на введение формалина в раннюю и позднюю фазы, а также количество животных с признаками токсических эффектов антагонистов NMDA-рецепторов (атаксия и стереотипные

движения головы). На этом методе анализа был построен и расчет среднеэффективных доз (см. ниже).

2.4