Определение эффективности обеззараживания в практических условиях

Эффективность дезинфекции в очаге контролируют дезинфекционные станции и дезинфекционные отделения санитарно-эпидемиологических станций.

Основные, наиболее распространенные методы контроля эффективно­сти обеззараживания белья, выделений, поверхностей и посуды при кишеч­ных инфекциях и туберкулезе.

Инструкция рекомендует пользоваться в качестве тест-культур золо­тистым стафилококком и кишечной палочкой.

Бактериологический контроль качества дезинфекционной обработки очагов кишечных инфекций. Бактериологический контроль качества обеззараживания очагов кишечных инфекций (дизентерия, брюшной тиф, паратифы А и Б, инфекционный гепа­тит и др.) при проведении заключительнойи текущей дезинфекции производят мето­дом обнаружения кишечной палочки. Кишечная палочка по своей устойчивости к дезин­фекционным средствам близка к устойчивости возбудителей кишечных инфекций. Поэ­тому обнаружение при бактериологическом ковтроле кишечной палочки после Прове-

дения заключительной или текущей дезинфекции свидетельствует о неудовлетвори­тельном качестве обеззараживания очага кишечных инфекций.

При проведении контроля качества заключительной дезинфекции забор проб производят с поверхности тех предметов, которые играют преимущественную роль в механизме передачи кишечных инфекций, а именно: в уборной (ручка слива, поверх­ность унитаза, дверь, ночной горшок); матрац, одеяло больного; пол, подоконники, стены у постели больного; игрушки, предметы обстановки, посуда (столовая и чай ная), дверь комнаты и др. При этом обязательно учитывать возможность повторного инфицирования тех или других объектов.

При обработке помещений хлорсодержащими дезинфекционными средствами про­бы берут при помощи ватных тампонов, смоченных стерильным 1% раствором гипо­сульфита.

Растворы гипосульфита (1%) стерилизуют в автоклаве при давлении 0,75-— 1 атм. в течение 20 минут. Хранят простерилизованный раствор гипосульфита в темном месте и не более 7—10 дней.

В случаях применения для обеззараживания других дезинфекционных средств (лизол, нафтализол и др.) пробы берут ватным тампоном, смоченным стерильной водо­проводной водой.

Смывы производят с 5—10 предметов с охватом площади каждого размером не менее 200—300 см². Указанный размер площади определяют наложением на 2—3 смежных участка обследуемого объекта стерильного трафарета — рамки (деревянной, картонной, металлической), просвет которой равен 100 см².

При заборе проб с игрушек, посуды и т. п. смывы тампоном производят с поверх­ности всего объекта, с каждого предмета — одним тампоном (всеми его сторонами) и при помощи одного и того же трафарета. Тампон после использования помещают обратно в стерильную пробирку, а края ее обжигают на пламени горелки.

На пробирке должен быть отмечен порядковый номер и под тем же номером заносят в список предмет, с которого взята проба.

Пробы берут с учетом срока экспозиции для обеспечения бактерицидного дей­ствия дезинфекционного средства и устранения возможности повторного инфицирова­ния предмета не ранее 45 минут и не позже I—2 часов по окончании дезинфекции очага.

При заборе проб записывают адрес, фамилию, имя, отчество и возраст больного, диагноз, дату заболевания, дату госпитализации, дату и время дезинфекции, дату и время забора проб, санитарное состояние квартиры, была ли произведена текущая дезинфекция, способ дезинфекции посуды и белья (обработка дезинфицирующим сред­ством или кипячением) и фамилии дезинфекторов бригады.

Пробы доставляют в лабораторию не позднее 2 часов после снятия смывов.

Методика лабораторного исследования (вариант 1). Тампоны, достав­ленные в лабораторию, погружают в пробирку (того же диаметра, в кото­рой находился тампон), с 5 мл среды Эйкмана.

Засеянные пробирки ставят в термостат при температуре 42—43° на 18 часов, а затем, при наличии помутнения, платиновой петлей на среду Эндо в чашку Петри делают высев.

Для получения изолированных колоний петлю с забранным материалом погру­жают у края чашки Петри в толщу агара, а затем извлекают и делают ею в том же месте ряд штрихов. После этого наносят отдельные штрихи на остальную поверхность сре­ды Эндо.

Засеянные чашки Петри ставят в термостат при температуре 37 или 42—43° до следующего утра.

Утром чашки Петри просматривают и:

1) при отсутствии колоний на среде Эндо исследование заканчивают;

2) при наличии характерных для кишечной палочки колоний делают мазок из отдельной колонии и красят по Граму.

Если при микроскопировании мазка будут отсутствовать грамотрица- тельные палочки, то на этом этапе исследование заканчивают.

При обнаружении же в мазке грамотрицательной неспороносной палоч­ки производят посев колоний из чашки Петри в среды Гисса или только

в среде с глюкозой. Среды Гисса разливают в агглютинационные пробирки по 0,5 мл. Засеянные пробирки помещают в термостат при температуре 42—• 43° на 2—3 часа. При наличии по истечении указанного времени в средах Гисса (или в среде с глюкозой и маннитом) кислоты и газа анализ считается законченным и в зависимости от результатов дается оценка качества дезин­фекционной обработки очага.

Дезинфекцию считают удовлетворительной при отсутствии роста кишеч­ной палочки во всех исследованных смывах, при наличии роста кишечной палочки в одной из 5—10 проб, взятых по прошествии 1—2 часов по окон­чании дезинфекции с тех объектов, на которых исключена возможность повторного инфицирования, как, например, матрац, одеяло, стена у посте­ли больного и т.

Дезинфекцию считают неудовлетворительной при обнаружении кишеч­ной палочки хотя бы в одной пробе при выполнении всех перечисленных условий.

Методика лабораторного исследования (вариант 2). Тампоны погружают в пробирки, содержащие 2 мл среды Эйкмана. Засеянные пробирки ставят в термостат или в водяную баню при температуре 42—43"на 6 часов. По прошествии указанного времени градуированной пипеткой переносят 0,5 мл среды Эйкмана из пробирок, в которых обнаружится помутнение, на среду Эндо и равномерно распределяют посев шпателем Дригальского по поверх­ности среды.

Открытые чашки Петри с засеянной средой Эндо помещают в термостат при температуре 42—43° на 30—40 минут для подсушивания, после чего их закрывают крышками и оставляют в этом же термостате на ночь.

В дальнейшем все исследования производят так же, как указано в пер­вом варианте.

Исследование по второму варианту может быть закончено в отличие от первого варианта к концу второго рабочего дня, считая со дня взятия проб.

Методика забора проб с загрязненного фекалиями белья, обеззараженно­го путем замачивания в дезинфицирующих растворах. Из бака или другого сосуда, в котором обеззараживалось белье, по истечении срока экспозиции извлекаются три штуки белья, причем из различных уровней сосуда (верх, -середина, низ—дно).

При помощи платиновой петли, предварительно обожженной на пламени горелки, с каждой из трех штук белья берут небольшой комочек фекалий и засевают на чашку со средой Эндо.

При отсутствии на белье видимых загрязнений соскобы производят с мест, чаще всего подвергающихся загрязнению. При соскобе место забора расправляют и хорошо его натягивают, а затем при помощи фламбирован­ного скальпеля производят соскоб с площади около 100 см². При этом скаль­пель держат под углом к поверхности белья и двигают его только в одном направлении, не допуская перевертывания лезвия.

По окончании взятия пробы скальпель погружают в пробирку с мясо­пептонным бульоном.

При контроле качества обработки белья хлорсодержащими растворами добавля­ют в питательный бульон і мл 1% стерильного раствора гипосульфита.

Засеянные в очаге инфекции пробирки и чашки Петри в тот же день .доставляют в лабораторию и помещают в термостат при 37° на 24 часа.

По истечении этого срока:

а) посев из чашек Петри исследуют на кишечную палочку по общепри­нятой методике;

б) из пробирок производят высев на чашки со средой Эндо и помещают в термостат при 37° на 24 часа, после чего ведут исследование на кишечную палочку по принятой методике.

В зависимости от результатов бактериологического исследования дают оценку качества дезинфекции белья. Удовлетворительная — при отсут­ствии роста кишечной палочки во всех исследованных пробах. Неудовлетво­рительная — при обнаружении кишечной палочки хотя бы в одной из взятых проб.

Имеются и другие методы контроля, как, например, определение нали­чия возбудителей дизентерии по нарастанию титра фага.

Контроль эффективности обеззараживания мочи. К моче добавляют дезинфектант или его раствор в количестве, предусмотренном инструкцией. После окончания дезин фекции (экспозиции) в очаге делают посев на среды (следует помнить, что при наличии у дезинфицирующего средства нейтрализатора его следует внести в питательную среду в количестве І—2 мл на 50 мл бульона, если он индифферентен в отношении микробной клетки); мочу в количестве 1 мл переносят в пробирку с 50 мл бульона; после тщатель­ного смешивания 1 мл жидкости из первой пробирки с бульоном переносят во вторую с таким же количеством среды и затем засевают по 0,1 мл на чашку как из первой, так и из второй пробирки. При заражении мочи кишечной палочкой высев делают на среду Эндо, а стафилококком — на мясо-пептонный агар. Первые пробирки отбра­сывают, посевы доставляют в лабораторию и в тот же день ставят в термостат; через сутки проводят ориентировочный учет результатов, а через 2 суток — окончательный. Отсутствие роста в течение 2 суток указывает на доброкачественность проведенной дезинфекции.

Контроль эффективности обеззараживания кала. В очаге после окончания дезин­фекции берут пробы жидкой части кала пипеткой в одну пробирку, а комочки петлей в другую (лучше петлей в виде ложечки 3 см в диаметре, сделанной из 3—-4 завитков проволочки из перегоревшей электролампы) и помещают в пробирки.

Определение эффективности обеззараживания посуды. В очаге до и после дезин­фекции отбирают наиболее употребительную посуду: стаканы, блюдца, тарелки, поиль­ники, вилки, ложки и др. (5—6 объектов). Стерильными марлевыми салфеточками (5?5 см), увлажненными стерильной водопроводной водой, с помощью стерильного пинцета протирают отобранную ложку, вилку или квадрат (5 ? 5 см) на посуде. Исполь­зованную салфетку помещают в колбу или пробирку со стерильной водой или 1 % раствором гипосульфита. После тщательного взбалтывания каждой колбы или про­бирки в течение 2 минут салфетку отжимают о внутреннюю стенку сосуда и удаляют. После доставки в лабораторию 0,2 мл жидкости от каждой пробы засевают на ага­ровую среду в чашки Петри и помещают в термостат на 48 часов, а затем подсчиты­вают выросшие колонии. При выявлении колоний, подозрительных на патогенную микрофлору, смыв с салфеток засевают на среду Левина или среду «Ж» для выявления дизентерийной палочки, на среду с кровяным агаром или Гарро (агар с генцианвиоле- том) для выявления гемолитического стрептококка и на среду Вильсон — Блера для выявления палочек брюшного тифа.

Дезинфекция считается удовлетворительной при отсутствии кишечной палочки и отличной, если достигнута полная стерильность.

Определение эффективности обеззараживания поверхностей. При определении эффективности дезинфекции поверхностей в практических условиях берут пробы при помощи салфеточек до и после проведения дезинфекции или только после дезин­фекции.

При использовании для дезинфекции хлорсодержащих препаратов забор проб производят при помощи влажпых. тампонов, смоченных 1% раствором гипосульфита. Последний стерилизуют в автоклаве при давлении 0,75—1 атм. в течение 20 минут. Хранят стерильный раствор гипосульфита в темном месте не долее 7—10 дней. В слу­чае применения для обеззараживания других дезинфицирующих препаратов (лизола,

нафтализола и др.) пробы берут влажными тампонами или салфеточками, смоченными стерильной водопроводной водой.

Смыв при помощи тампонов производят с различных предметов (пяти мест) с охватом площади не менее 500 см². Указанный размер определяют наложением на 2—3 смежных места обследуемого объекта стерильного трафарета — рамы (деревян­ной, картонной, металлической), просвет которой равен 100 см².

После дезинфекции забор проб производят с учетом срока экспозиции, обеспечи­вающей бактерицидное действие дезинфицирующего средства, но не ранее 30 минут и не иозже I часа при вегетативных формах и 2 часов — споровых формах микроорга­низмов.

Пробы берут с поверхностей тех предметов, которые играют преимущественную роль в механизме передачи инфекции: пола, стен у постели больного, игрушек, кухон­ного и обеденного стола, стула, с матрацев, одеяла больного, подоконников, двери комнаты и др.

Количественный показатель убыли микрофлоры выражают в процентах.

Поскольку .методы определения во внешней среде возбудителей инфекционных заболеваний разработаны слабо, эффективность обеззараживания определяют по кишеч­ной палочке, которая после дезинфекции не должна обнаруживаться (см. Обеззара­живание в очагах кишечных инфекций).

В настоящее время выдвинуто предложение при обеззараживании в очагах туберкулеза определять эффективность обеззараживания по наличию или отсутствию туберкулезной микобактерии на обеззараженных объектах (см. Обеззараживание при туберкулезе). Но в связи с тем что ее трудно выделить, то об эффективности обезза­раживания в основном судят по наличию или отсутствию кишечной палочки на обез­зараженных объектах.

Бактериологический контроль обеззараживания кисточек для бритья. При бакте­риологическом анализе бритвенных кисточек после дезинфекции следует различать два момента: бактериологическое исследование новой бритвенной кисточки, не быв­шей еще в употреблении, и бактериологическое исследование кисточки для бритья, бывшей в употреблении.

1. Бактериологическое исследование новых бритвенных кисточек. Три — четыре кисточки после дезинфекции 4% формалином помещают в стерильные стаканы (каж­дую кисть отдельно) я заливают 0,25% раствором аммиака для нейтрализации форма­лина. Затем каждую кисточку переносят в отдельный стерильный стакан и заливают 50 мл стерильной водопроводной водой. Промывную воду по 0,1 мл засевают на 2 чашки Петри с агаром. На второй день после инкубации чашек с посевами в термоста­те определяют выросшую микрофлору; при подозрении выросших колоний на сибир­скую язву проводят полный бактериологический и биологический контроль.

2. Бактериологическое исследование кисточек, бывших в употреблении. После их обеззараживания проводят отбор для анализа непосредственно из ванн, бучильни- ка, центрифуги и из пакета при упаковке. Отобранные кисти не подвергают нейтрализа­ции, если их обеззараживали (дезинфицировали) горячей водой.

Посев промывной воды для каждой кисточки (0,1 мл) производят на поверхность агара и на поверхность среды Эндо в чашках Петри. Кисточки, не содержащие веге­тативной флоры, допускаются к употреблению. В противном случае их подвергают повторной дезинфекции.

Бактериологический контроль результатов дезинфекции при туберкулезе (в очаге). Лабораторный контроль качества дезинфекции при туберкулезе проводят при текущей и заключительной дезинфекции. Данный метод контроля может быть использован в очаге в целях определения обсемененности предметов внешней среды бактериями туберкулеза.

При оценке эффективности обеззараживания при туберкулезе забранные пробы до и после (через 45—120 минут) проведения дезинфекции или только после дезинфек­ции доставляют в лабораторию в возможно короткий срок — неболее чем через 2 часа.

Пробы берут путем протирания стерильным ватным тампоном, укрепленным на палочке, поверхностей тех предметов, которые находились в непосредственной близо­сти к больному туберкулезом. Перед употреблением тампон смачивают стерильным физиологическим раствором.

Пробы берут с плевательниц, с пола у постели больного, с пола в том месте, где обеззараживали мокроту, со спинки кровати больного, со стены у изголовья посте­ли больного, с посуды (3 предмета в одну пробу), мебели, книг и других вещей, которы­ми пользовался больной. В случае обеззараживания вещей (одеяла, подушки, ковра и т. д.) с них также берут пробы.

Пробы с предметов, обработанных хлорсодержащими препаратами, берут ватны­ми тампонами, смоченными стерильным 1% раствором гипосульфита.

Смывы с каждого объекта производят одним тампоном (всеми сторонами), поме­щают его в стерильную пробирку с пробкой (в которой он доставлялся в очаг). Про­бирки с тампонами устанавливают в специальный ящик с гнездами для них и крышкой.

На пробирке отмечают порядковый номер и под тем же номером заносят в список, предмет, с которого взята проба.

При сборе проб отмечают: адрес, фамилию, имя, отчество и возраст больного» диагноз и дату заболевания, дату и время проведения дезинфекции, расход дезинфи­цирующих средств и площадь пола обработанного помещения, санитарное состояние- квартиры, производилась ли текущая дезинфекция, способы дезинфекции мокроты, белья, посуды (дезинфицирующим средством или кипячением), номер наряда, фамилии дезинструкторов бригады.

При текущей дезинфекции пробы забирают со следующих объектов: пола у кро­вати больного, пола в том месте, где обеззараживали мокроту, плевательницы и посуды больного.

Пробы берут так же, как и при контроле эффективности по поводу кишечных инфекций.

При контроле эффективности обеззараживания посуды последнюю тщательно* протирают тампонами или салфетками (5x5 см), слегка смоченными в физиологическом растворе. Использованные тампоны и салфетки помещают В колбы с физиологическим раствором (10 мл на каждый тест) с бусами и доставляют в лабораторию.

Контроль обеззараживания поверхностей при туберкулезе. После окончания экспозиции поверхности (30x50 см) тщательно протирают стерильной увлажненной марлевой салфеткой в течение 2 минут. В целях контроля эффективности обеззаражи­вания используют также тест-объекты. Тесты из дерева, линолеума, а также окрашен­ные масляной краской, оклеенные обоями, оштукатуренные и т. д. размером IOx 10 см заражают мокротой (не гомогенизированной) из расчета 1 мл мокроты на 100 см². Равномерность нанесения достигают путем тщательного растирания мокроты стеклян­ным шпателем. Подсушивание производят при комнатной температуре в течение суток. Тесты развешивают на поверхностях, подлежащих обеззараживанию; после обезза раживания тесты доставляют в лабораторию, где их протирают тампонами.

Контроль обеззараживания мокроты. В случае определения эффективности дезинфекции мокроты после выдерживания заданной экспозиции и нейтрализации дезинфектанта (если имеется) доставляют в лабораторию.

Контроль эффективности камерного обеззараживания при туберкулезе. Эффективность камерного обеззараживания проверяют, используя мето­ды, аналогичные тем, которые применяют при других инфекциях с той лишь разницей, что, кроме золотистого стафилококка, используют также непатогенный кислотоупорный сапрофит «В-5». Последний по своей устойчивости несколько превосходит штамм микобактерий туберкулеза, он морфологически сходен с микобактериями туберкулеза, растет на тех же средах, но в значительно более короткие сроки. Выраженный рост отмечается на 3—4-й день.

Методы лабораторного анализа взятых проб. При исследовании соско- бов, смывов, а также жидкости, полученной после промывания тестов, тампо­нов и др., пользуются культуральным и биологическим методами.

а) Культуральный способ исследования. Ватную часть тампонов, до­ставленных в лабораторию, снимают стерильным пинцетом и погружают в широкие пробирки с 20 мл стерильного физиологического раствора с бусами, после чего их тщательно встряхивают в течение 10 минут.

Смыв сливают в стерильный узкогорлый пузырек, а тампон дополни­тельно промывают 20 мл физиологического раствора и смыв снова сливают в тот же пузырек. Тампон после отжатия пинцетом выбрасывают в бак для обеззараживания. В целях извлечения микроорганизмов жидкость центри­фугируют или используют метод флотации.

Метод флотации^[XXVI]. К смывной жидкости добавляют 10 мл 0,5% NaOH; после встряхивания в течение 10 минут прибавляют несколько капель бен­зола или бензина и вновь встряхивают, после чего доливают до горлышка посуды стерильной водопроводной воды. Через 15—20 минут у горлышка

образуется сливкообразное флотационное кольцо, из которого производят посевы на различные питательные среды по 0,2 мл и заражение животных (морских свинок и белых мышей). При использовании метода флотации исключают прогревание на водяной бане (которое применяют в диагностиче­ских лабораториях), так как последнее может понизить жизнеспособность бактерий или привести их к гибели.

При сборе проб до дезинфекции необходимо флотационное кольцо отсосать, перенести в центрифужную пробирку и долить примерно равное количество 10% раствора серной кислоты; затем пробирку встряхивают 3—5 минут и оставляют до получения нового флотационного кольца, из которого производят посев и заражение животных.

Метод осадка. Омывную жидкость последовательно центрифуги­руют в одной центрифужной пробирке, без взмучивания осадка; после центрифугирования всю надосадочную жидкость, а также надосадочную- часть отмывной жидкости сливают, к осадку добавляют 8 мл 5% раствора серной кислоты. Осадок взбалтывают с серной кислотой и вновь центрифу­гируют. После дополнительной промывки стерильным физиологическим раствором осадка последний разбавляют физиологическим раствором и про­изводят посев на питательную среду.

При культуральном методе исследования центрифужный осадок (полу­ченный после центрифугирования жидкости, использованной для отделения снятых тампонами с поверхности бактерий) разбавляют физиологическим раствором и производят посевы на питательную среду Петраньяни, Соловь­ева или кровяную среду. Наблюдение за посевами продолжают в течение 2 месяцев, при этом наличие роста проверяют через каждые 3—4 дня.

Среда Соловьева в прописи Центрального дезинфекционного института. 1кг очищенного и мелко нарезанного картофеля заливают 3 л водопроводной воды и варят в тече­ние 2 часов на открытом огне. Полученный отвар (около 2 л) процежи­вают через 1 слой марли и к нему добавляют 0,5% глюкозы, 0,5% аспарагина и 0,03% однозамещенного фосфорнокислого натрия, затем при постоянном помешивании разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм (110°) в течение 20 минут. После стерилизации в пробирках образует­ся небольшой осадок, состоящий из крахмальных зерен.

Кровяная среда в прописи Центрального на­учно-исследовательского дезинфекционного ин­ститута. В стерильные пробирки с 3 мл 1 % раствора аспарагина добав­ляют стерильно перед посевом 1 мл человеческой крови. Добавление аспара­гина и фосфорнокислого натрия (однозамещенного) к последним двум средам ускоряет рост туберкулезных микобактерий. Использование их позволяет получать рост туберкулезных микобактерий в короткие сроки (10— 14 дней).

б) Биологический способ исследования. Заражают белых мышей весом 20 г или морских свинок весом 300—-350 г.

Биологический метод изучения на морских свинках более чувствителен, чем культуральный. Подкожно вводят 3 мл разведенного осадка или воды, в которой отмывали тест (как до дизинфекции, так и после нее) перед его посевом. При наличии бактерий туберкулеза морская свинка погибает через 2—3 месяца. При вскрытии обнаруживают типичные туберкулезные пора­жения разных органов. Заболевание туберкулезом морской свинки может быть установлено на 3—4-й неделе при помощи туберкулиновой реакции;, иногда на 4—10-й день можно отметить увеличение и уплотнение лимфати­ческих желез.

Биопроба может быть проведена и на белых мышах (вес 10—20 г), что укорачивает сроки наблюдения. Заражать мышей можно или внутривенно в хвостовую вену по 0,2—0,4 мл, или путем внутримозгового заражения (до 0,1 мл). Материалом каждого смыва заражают не менее 5 мышей.

Отдельные очаги туберкулеза появляются в организме на 6—7-й день, а на 16—18-й день эти очаги охватывают уже различные органы. Типичная картина заболевания развивается к 40—42-му дню. При таком способе зара­жения в большинстве случаев пораженными оказываются легкие.

На 7—8-й день забивают из каждой партии по 2 мыши и делают мазки из паренхиматозных органов легких, печени и селезенки для обнаружения в них туберкулезных -микобактерий. Оставшихся мышей убивают на 13— 14-й день и определяют степень поражения макро- и микроскопическими методами.

в) Оценка эффективности дезинфекции. Оценку результатов качества дезинфекции в очаге туберкулеза устанавливают по следующим показате­лям: удовлетворительной дезинфекцию считают при отсутствии роста мико­бактерий туберкулеза на питательных средах, отсутствие их при микро­скопировании паренхиматозных органов белых мышей и при отсутствии у мышей или морских свинок специфических поражений.

Неудовлетворительной оценка дезинфекции считается при обнаружении роста микобактерий туберкулеза хотя бы одной из засеянных пробирок или обнаружение микобактерий туберкулеза при микроскопировании паренхи­матозных органов экспериментальных животных.

Бактериологический контроль эффективности обеззараживания в дезинфекцион­ных камерах. Дезинфекционные камеры 2 раза в год проверяют в отношении эффек­тивности обеззараживания. Проверку производят путем определения температуры или при помощи тест-объектов, зараженных бактериальной культурой, или одновременно при помощи того и другого метода.

В камерах, в которых теплоносителем является движущийся воздух, при теп­ловом контроле определяют температуру перед входом его в камеру и по выходе из нее.

В камере для определения температуры размещают предварительно проверенные максимальные термометры в трех плоскостях: в верхней зоне, науровне воротников развешиваемой одежды, в средней зоне (на уровне карманов) и в нижней зоне, соответ­ствующей положению полы верхней одежды, термометры размещают в пяти точках каждой плоскости (по углам и в центре).

В камерах с площадью пола более 2 м® рекомендуется помещать по 9 термометров в каждой горизонтальной плоскости (всего 27 термометров).

В небольших камерах закладывают по три термометра в каждой горизонтальной плоскости — два по противоположным углам (по диагонали) и один в центре. При наличии верхней одежды термометры закладывают под воротники, в карманы и в полы.

При проверке бактерицидного эффекта в качестве эталона в отношении вегета­тивных форм микробов используют золотистый стафилококк. Эталоном для проверки эффективности обеззараживания вещей, зараженных споровыми формами, служит культура антракоида.

Бактериальные тесты закладывают в стерильные мешочки из хлопчатобумажной ткани (5x5 см). Каждый мешочек завертывают в стерильную бумагу и помещают в ящи­чек с крышкой, который закрывают и пломбируют, после чего направляют в помеще­ние, где находится камера. В камере тесты закладывают в вещи вместе с максимальны­ми термометрами. Часть из тестов может быть положена в пробирки и закрыта ватны­ми пробками. Бумагу,'в которой находились бактериальные тесты, также закладывают в камеру. Контрольный тест размещают отдельно в более плотной бумаге. Часть тест- объектов остается для контроля и обработке не подвергается. После окончания испы­тания камеры мешочки с бактериальными тестами укладывают на бумагу, одновремен­но подвергавшуюся обеззараживанию в камере, завертывают и кладут в ящик, кото­рый доставляют в лабораторию для исследования. Тесты засевают в бульон. Вначале производят посев опытных, а затем контрольных тестов.

Инсектицидный эффект работы камер проверяют путемзакладки в вещи биоло­гических тест-инсектов (вши и их яйца).

Методы учета микрофлоры воздуха при его обеззараживании. Вопросы дезинфекции воздуха до сих пор еще пе разрешены. В целях обеззаражива­ния воздуха изучают бактерицидность ряда препаратов, которые вводят в воздух путем испарения или распыления. Находят себе применение и ультрафиолетовые лучи. Эффективность обеззараживания дезинфициру­ющими препаратами и ультрафиолетовыми лучами определяется по уменьше­нию числа микроорганизмов в 1 м’ воздуха. Средство считают эффективным, если через 10—15 минут количество микроорганизмов в воздухе снижается до 10% и ниже.

При изучении эффективности препарата в лабораторных условиях бульонную культуру (стафилококк ИЛИ стрептококк) ИЛИ С1МЫВ культуры с твердой питательной среды (последнюю разводят до 2 млрд.) распыляют в бокс из распылителя (компрессором, пылесосом) в количестве 0,2—0,5 мл на 1 м³ воздуха, после чего немедленно берут контрольную пробу воздуха и затем вводят в воздух изучаемый препарат. Пробы воздуха из бокса берут для определения уменьшения микрофлоры через 5—15—30—45 ми­нут после испарения или распыления препарата. В лабораторных условиях для учета микрофлоры воздуха пользуются жидкостным методом. Bnpy- лицидные свойства препаратов в отношении вируса гриппа определяют по снижению количества заболевших мышей.

В последнем случае мышей в клетках из сетки помещают в бокс через специальное отверстие в стенке бокса и сейчас же или через 10—30 минут после распыления вируса (эмульсии 1 : 10 из растертых легких белых мышей), испарения или распыления изучаемого препарата. Каждую из пар­тий держат в боксе в течение часа. Контролем служит аналогичный спе­циальный опыт, в котором в бокс вводят только вирус (без последующего введения препарата). Кроме того, дополнительным контролем может быть партия мышей, посаженная в бокс после распыления вируса до распы­ления дезинфектанта. Наблюдение за подопытными и контрольными мыша­ми ведут в течение 2 недель. Эффективность определяют по разнице в гибели животных в опыте и контроле, а также по отсутствию поражений легких у мышей. Препарат считают эффективным, если в партии мышей, поса­женных через 10—30 минут после распыления дезинфектанта, отмечают 90—100% выживаемость животных и отсутствие поражений легких, а в кон­троле — 90—100% гибель.

При определении количества микроорганизмов в воздухе может быть использован один из существующих методов (см. том I).

Все применяемые методы для микробиологического исследования воздуха могут быть разделены на три группы: основанные на принципе седиментации, фильтрации и ударного действия воздушной струи. В настоя­щее время чаще всего используют последние. При изучении наружного воздуха целесообразно производить исследование одновременно двумя методами, дополняющими друг друга (осадочным и аппаратом Ю. А. Кро­това или методом мембранных фильтров).

Аппарат конструкции Кротова представляет собой цилиндр, закрывае­мый сверху съемной крышкой, под которой на столике, вращающемся от турбулентного потока воздуха, устанавливают чашку Петри с плотной питательной средой (рис. 92).

Фильтрационные методы исследования воздуха. Одним из простей­ших способов исследования воздуха является метод Дьяконова, который в различных модификациях используют в практических условиях. Способ основан на просасывании определенного объема воздуха через стерильную жидкость (физиологический раствор, бульон и др.). Практически это сво-

дится к тому, что воздух просасывают через один или два последовательно соединенных поглотителя (дрексель или специальные сосуды этого типа), содержащие по 15—30 мл жидкости. Пользуются также стеклянными поглотителями с боковыми вмятинами, через горловую часть которых пропущены две стеклянные трубки, припаянные к сосуду. Стеклянные трубки можно пропустить через резиновую пробку сосуда или большой пробирки. Воздух пропускают через эти трубки: приводящую, погружен­ную в жидкость, и отводящую, находящуюся выше уровня жидкости.

Рис. 92. Аппарат конструкции Кротова.

Рис. 93. Цилиндр с бу­сами — прибор для улав­ливания микроорганиз­мов из воздуха.

Просасывание воздуха производят с помощью электрического, водоструй ного насоса или путем использования 2-бутылей с тубусом, причем из одной вытекает вода в нижестоящую бутыль (рис. 93).

Лабораторный бактериологический контроль дезинфекции допол­няют химическим контролем анализа проб исходных дезинфицирующих веществ, а также приготовленных из них на местах работы растворов. В первом случае устанавливают количественное содержание действующего вещества, а во втором проверяют правильность приготовления рабочих растворов и содержание в них действующего вещества.