Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica)

Дизентерийная амеба была открыта в 1875 г. русским ученым Ф. А. Лешем, работавшим в Петербургской медико-хирургической академии (ныне Воєнно медицинская ордена Лепина академия имени С.

Дизентерийная амеба в организме человека встречается в трех формах:

1) вегетативная крупная форма (или тканевая);

2) вегетативная мелкая кишечная форма (или коМ- менсальная);

3) индистированная форма (циста).

Первая форма дизентерийной амебы (тканевая) живет в тканях кишечника человека. Опа является болезнетворной (патогенной) и вызывает заболевание — дизентерию, или амеби аз. Вегетативная крупная фор-

j

I — эктоплазма; 2 — эндоплазма; 3 — ядро; 4 — карію- сома; 5 — периферический хроматин; 6 — вакуоль; 7 — эритроцит.

ма амебы проникает в подслизистую стенку кишечника, питается его тканями, вызывая изъязвления стенки ки- шечника. Питается эта форма амеб чаще эритроцитами (красные кровяные шарики), а также жидкими питательными веществами. В результате изъязвления стенок кишечника в полость кишечника поступает кровь, слизь и гной, которые и выделяются с испражнениями. Амебы током крови могут заноситься и в другие органы (чаще в печень), вызывая и там разрушение тканей и образование абсцессов (рис. 4).

Тканевую форму амебы можно наблюдать под микроскопом, беря свежие испражнения больного в остром периоде болезни (кровавый понос).

Рис. 4. Картина стула.

А — при амебной дизентерии: крупные дизентерийные амебы с заглоченными эритроцитами, свободно лежащие эритроциты в массе кала; Б — при хроническом амебиазе: мелкие дизентерийные амебы, цисты их, кристаллы Шарко- Лейдена.

Они быстро передвигаются; характерными для них являются стекловидные ложноножки, ясно отграниченные от мелкозернистой эндоплазмы. В протоплазме вегетативной формы паразита часто встречаются эритроциты, поэтому их называют эритрофагами (пожиратели эритроцитов) (рис. 4, А).

Мелкая кишечная форма встречается только в просвете толстой кишки. Размеры амеб 7—25 ц. Они медленнее передвигаются. Питаются бактериями и грибками, имеющимися в кишечнике, а не тканями организма (поэтому такую форму называют комменсальной). В просвете кишечника мелкая форма образует цисты (при инцистировании образуется двуконтурная бесцветная оболочка). При этом паразит принимает шарообразную или слегка овальную форму. Зрелая циста имеет четыре ядра. Цисты из кишечника выделяются во внешнюю среду вместе с калом. Во влажной среде цисты могут сохраняться до месяца и более; при высушивании и па свету быстро погибают. Попадают цисты в кишечник человека вместе с загрязненной водой, овощами и т. п. В тонком кишечнике оболочка цисты под влиянием ферментов поджелудочной железы (трипсина) растворяется. Освободившаяся амеба делится на четыре маленькие амебы, которые проходят в просвет толстой кишки, питаясь ее содержимым (бактериями и грибками); оставаясь в виде мелкой формы, они также способны давать цисты (рис. 5).

Людей, в испражнениях которых обнаруживают цисты (даже если эти люди не больны дизентерией), называют паразитоносителями; они могут представлять опасность для окружающих. При ослаблении организма человека-паразитоносителя и при воздействии на него различных вредных факторов (различные заболевания и др.) создаются благоприятные условия для перехода вегетативной мелкой формы в вегетативную крупную форму, т.

Инкубационный период при заболевании амебиазом длится от 20 дней до 3 месяцев и более.

Диагностика. Диагноз ставится при обнаружении в испражнениях вегетативных крупных и мелких форм амеб и цист.

Лабораторные методы исследования. Для обнаружения активных форм амеб в испражнениях

2*

их собирают в чистую подогретую посуду (стеклянные баночки, парафинированные стаканчики и т. п.) и исследуют не позже чем через 30—40 минут. Кал до исследования содержится в теплом месте. Для обнаружения активных форм амеб еще лучше подвергать

Рис. 5. Схема жизненного цикла дизентерийной амебы.

/ — цисты в наружной среде; 2 — эксицистирование; 3—4 — вегетативная форма (f. minuta) в просвете кишечника; 5 — тканевая форма (f. magna);

6 — цисты в кишечнике.

исследованию свежий, теплый кал, чего не требуется при исследовании кала на цисты; последние встречаются обычно в оформленном кале.

Исследования паразитов производят в нативных препаратах, которые готовятся путем нанесения на предметное стекло очень небольшого количества кала. Если кал жидкий, его наносят тонким слоем на подогретое до температуры тела человека стекло, а если густой, то его частицы размешивают с каплей физиологического раствора. Предметное стекло накрывают сверху покровным стеклом и рассматривают под микроскопом сначала с малым увеличением (объектив 10Х), а затем с сильным сухим объективом 40Х и иммерсией.

В других случаях производят исследования окрашенных препаратов. Нанесенную на предметное стекло частицу кала смешивают с каплей 2% раствора эозина в физиологическом растворе и накрывают покровным стеклом. Окраску эозином воспринимают только мертвые амебы и цисты (очень медленно).

Обработка йодом. Частицы кала смешиваются на предметном стекле с раствором Люголя (па 100 мл дистиллированной воды добавляют 1—5 г йода и 2—10 г йодистого калия; сначала растворяют йодистый калий, а затем добавляют йод).

Исследование производят также на препаратах, окрашенных гематоксилином. В этом случае необходимы реактивы: 1) фиксирующая жидкость (фиксатор Шаудина) —смесь, состоящая из одной части 96° спирта и 2 частей насыщенного водного раствора сулемы; к смеси добавляется на 1 мл 2 капли ледяной уксусной кислоты; жидкость готовят перед употреблением; 2) спирт 70°, 85° и 96°; 3) спирт-йод; к 70° спирту добавляют йодную настойку до цвета портвейна; 4) 2—5%, чаще 2,5% водный раствор железо-аммиачных квасцов для протравы и 1% раствор тех же квасцов для дифференцирования; кристаллы квасцов для приготовления раствора должны быть бледно-лилового цвета, без желтого налета; 5) ксилол; 6) карболксилол, который приготавливают из 1 части кристаллической карболовой кислоты и 3 частей ксилола; 7) канадский бальзам; 8) раствор гематоксилина, который приготавливают следующим образом: 1 г гематоксилина растворяют в 10 мл 96° спирта и доливают дистиллированной воды до 100 мл. Раствору необходимо «созреть», для чего он должен находиться на свету в теплом помещении в течение 3—4 недель в бутылке, прикрытой ватой. Перед употреблением берут нужное количество краски, разводят ее наполовину дистиллированной водой. Краска годна для многократного употребления, сс следует лишь перед употреблением фильтровать.

Приготовление мазков. Жидкий кал выливают в чашку Петри и выбирают слизистые, слизисто-гнойные и кровянистые участки. Из них берут маленькую частицу кала и готовят мазок. Для этого платиновой петлей или деревянной палочкой наносят на край покровного стекла небольшое количество кала и этим стеклом проводят по другому покровному стеклу (мазки можно делать и на предметных стеклах, однако это менее удобно) . Мазки следует делать быстро, избегать их подсушивания.

Фиксация и окраска. Еще влажные мазки, сделанные па покровном стекле, бросают (мазком вниз) в фиксирующую жидкость (реактив К° 1), налитую в чашку Петри. Через 5—10 минут препараты (соблюдая осторожность, чтобы не стереть мазок) переносят в баночку с 70° спиртом (реактив № 2) на 5—10 минут, затем в спирт-йод (реактив № 3) на 5 минут для удаления остатков сулемы и вновь в чистый 70° спирт, в котором они сохраняются до окраски.

После всей предыдущей обработки препараты промывают проточной водопроводной водой не менее 10—15 минут (или оставляют в воде на 30 минут, сменяя ее 2—3 раза). По окончании промывки (вода должна стечь) препараты погружают последовательно в 70° спирт, затем в спирт 85° и 96° па 2 минуты в каждый. Этим достигается обезвоживание препарата. Следующий этап—перенос в карболксилол (реактив № 6) на 2 минуты и в ксилол на 1 минуту; препараты при этом просветляются. Ксилол удаляют фильтровальной бумагой, па предметное стекло наносят каплю канадского бальзама и осторожно кладут мазком вниз покровное стекло. Пузырков воздуха не должно быть (последние удаляются легким нажимом на покровное стекло пинцетом). Препараты, заключенные в канадский бальзам, долго сохраняются без изменений. Необходимо иметь в виду, что для получения хорошей окраски нужно тщательно проводить все этапы обработки препаратов.

В неокрашенных (нативных) препаратах можно наблюдать вегетативные фермы, в протоплазме которых находятся эритроциты, и цисты амеб. Цисты имеют округлую форму с тонкой двуконгурной оболочкой, величина 12—14 (х. Зрелые цисты Entamoeba histolytica содержат не более четырех ядер. Некоторые цисты имеют 1—3 ядра и гликогеновую вакуолю в виде светлой зоны.

На постоянных, фиксированных и окрашенных препаратах легко выявить вегетативные формы и цисты дизентерийной амебы по ряду характерных признаков. Вегетативные формы амебы (крупные по размерам) имеют серовато-синего цвета мелкозернистую протоплазму. В протоплазме иногда встречаются небольшие вакуоли, свободные от бактерий, а также окрашенные в черный цвет эритроциты. Размер ядра около 5 р. Ядро покрыто тонкой оболочкой. К внутренней стороне оболочки ядра прилегают черного цвета мелкие зерна хроматина, расположенные в один ряд. В центре ядра всегда имеется маленькая, круглая, темного цвета кариосома.

На препаратах цисты сохраняют свою форму, оболочка их не окрашивается. Протоплазма их имеет серый цвет, кариосома и хроматин ядра черного цвета. В цистах, помимо ядер, можно обнаружить еще так называемые хроматоидные тела — интенсивно окрашенные в черный цвет включения в виде 1—3 палочек с округлыми концами. Присутствие хроматоидных тел является диагностическим признаком для цист дизентерийной амебы.

Профилактика амебиаза. Цисты амеб во влажном кале при температуре 12—14° сохраняются в течение 5 недель, в воде — до 2 месяцев. При температуре 68° они погибают в течение 5 минут. При высыхании цисты также быстро погибают. Обычное хлорирование воды на цист не действует. Профилактика при амебиазе должна быть направлена на защиту воды и продуктов питания от загрязпснения цистами энтамеб, а также на благоустройство уборных. Нужно иметь в виду, что переносчиками цист энтамеб являются мухи. Большое значение имеет личная гигиена человека, ибо источниками заражения могут являться как непосредственно больные дизентерией, так и цистопосители. Людей, больных амебиазом, необходимо госпитализировать. Чем раньше установлен диагноз, тем успешнее лечение. Лечение проводится по назначению врача.

Кроме патогенной формы амебы (дизентерийной амебы), в кишечнике человека встречаются другие виды амеб — непатогеипые. Они также являются паразитами (живут за счет питательных и других веществ хозяина), но не вызывают заболевания. Ниже мы даем их описание. Их необходимо знать и уметь отличить от патогенной Entamoeba histolytica.