5 Исследование на наличие синегнойной палочки, плесени, анаэробной микрофлоры
5.1 Для выделения, синегнойной палочки необходимо делать посев, из исследуемого материала на МПА и МПБ и инкубировать посевы в течение 6-7 суток в термостате при 37°С, проверяя рост каждые 1-2 дня.
При росте микроб продуцирует водорастворимый пигмент пиоцианин, который постепенно окрашивает бульон в зеленовато-голубой цвет. На МПА он даёт круглые голубовато-серые колонии. При микроскопии – грамотрицательная палочка.5.2 Производителей, в сперме которых выделена синегнойная палочка, исследуют трехкратно с интервалом 3-4 дня. Если при повторных исследованиях спермы выделяют синегнойную палочку, то это указывает на выделение палочки из организма со спермой. В таких случаях сперму от производителя не используют для осеменения, проводят тщательный клинический осмотр производителей и назначают необходимый курс лечения общего или местного характера.
5.3 Для исследования на плесень чашки с посевом на агаре после подсчета количества микробных тел оставляют при комнатной температуре на 8 суток в месте, удаленном от прямых солнечных лучей. По истечении этого срока чашки с посевами проверяют на наличие в них плесени.
5.4 Из спермы и смывов может быть выделена и анаэробная микрофлора. Чаще всего выделяют наиболее распространенный микроб — Васt. perfringens. Однако могут быть выделены и другие микробы.
5.5 Для выделения анаэробных бактерий, помимо соответствующей среды и температурного оптимума, требуется создание бескислородных условий. Лучше всего для выращивания анаэробов применять среду Китта-Тароцци.
Исследуемый материал засевают в 2 пробирки с указанной средой. Одну из пробирок после посева материала прогревают в водяной бане при 80оС в течение 20 минут для уничтожения сопутствующей вегетативной микрофлоры. Затем засеянные пробирки помещают в термостат при 37°С на 10 суток. На печеночном бульоне учитывают интенсивность роста, характер осадка, а также наличие и степень газообразования. Через каждые 3-4 дня, независимо от наличия или отсутствия признаков микробного роста, готовят мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют.
5.6 Обнаружение в сперме анаэробных микроорганизмов указывает на нарушения ветеринарно-санитарных требований при работе со спермой.