2.2. Методы оценки параметров иммунного статуса.

Т-лимфоциты (CD3+-клетки).

Современными методами оценки содержания Т-лимфоцитов и других субпопуляций иммунокомпетентных клеток являются методы, основанные на использовании моноклональных антител к CD-маркерам (лимфоцитотоксический тест, иммунофлуоресцентный тест, проточная цитометрия).

- относительное содержание CD3+- (65-79) %, - абсолютное содержание (1100 – 1700) кл/мкл или (1,1 – 1,7) ? 10 9/л Причины повышения содержания Т-лимфоцитов: 1. Лимфопролиферативные заболевания. 2. Реакции гиперчувствительности замедленного типа - ГЗТ.

3. Реконвалесценция (выздоровление). Причины снижения содержания Т-лимфоцитов: 1. Вирусные, грибковые, паразитарные хронические инфекции 2.Опухоли 3. Стресс 4. Травма 5. Ожоги 6. Кровоизлияния 7. Некоторые формы аллергии.

Норма CD4+-клеток (Т-хелперы):

- относительное содержание 39 - 50 %, - абсолютное содержание 600 - 1000 кл/мкл или 0,6 - 1,0 ∙ 10 9/л Причины повышения содержания Т-хелперов: 1. Инфекция. 2. Аллергия. 3. Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, васкулиты, гемолитическая анемия, аутоиммунные гломерулонефриты и др.). Причины снижения содержания Т-хелперов:

1. Иммунодефицитные состояния. 2. СПИД. 3. Цитомегаловирусная инфекция.

В-лимфоциты (CD19+-клетки). Для выделения В-лимфоцитов из общей популяции лимфоцитов используют моноклональные антитела CD19, 21, 22, 23, 72, 79. Норма:

- относительное содержание 3 - 15 %; - абсолютное содержание 40 - 400 кл/мкл или 0,04 - 0,4 ∙ 10 9/л. Причины повышения содержания В-лимфоцитов: 1. Бактериальные инфекции. 2. Аутоиммунные заболевания. 3. Аллергические заболевания. 4. Лимфолейкозы.

Исследование функционального состояния лимфоцитов.

Для определения функционального состояния лимфоцитов исследуют способность этих клеток размножаться в ответ на введение митогенов (веществ, стимулирующих размножение) в реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с ФГА – митогеном для Т-клеток. Снижение пролиферативного ответа на ФГА свидетельствует о наличии иммунодефицита, однако причины его могут быть различными. Повышение пролиферативного ответа на ФГА может свидетельствовать о наличии инфекции или какой-либо аутоиммунной патологии.

Оценка функционального состояния фагоцитов.

Фагоцитарную активность оценивают с помощью методов, позволяющих определить долю клеток, способных формировать внутри себя "пищеварительный пузырек" - фагосому. Антигенный материал - частицы латекса, эритроциты, тест-культуры бактерий (например, кишечной палочки). Под понятием "фагоцитарный индекс" (норма- 40-80 %) подразумевается процент нейтрофилов с поглощенным антигенным материалом. Для оценки кислородозависимой микробицидной способности нейтрофилов используют НСТ-тест (НСТ - краситель нитросиний тетразолий). Поглощение фагоцитами микробов сопровождается повышением потребления кислорода этими клетками и образованием перекиси водорода и свободных радикалов кислорода (те и другие можно объединить под названием - активные формы кислорода - АФК). Суть реакции состоит в том, что НСТ в присутствии АФК окрашивается в синий цвет, а в отсутствии АФК остается бесцветным (норма- 5-12%).

Причины повышения фагоцитарной активности лейкоцитов: - острые бактериальные инфекции;

- постоперационный период. Причины снижения фагоцитарной активности лейкоцитов: - иммунодефициты врожденные; - хронические инфекции; - аутоиммунные заболевания; - аллергические заболевания; - вирусные инфекции; - СПИД.

Сывороточные антитела определяют методом радиальной иммунодиффузии.

Норма для IgA: 0,7 – 3.1 г/л Причины повышения содержания IgA: - острые инфекции на слизистых верхних дыхательных путей; - гепатиты, холециститы, билиарный цирроз;

- саркоидоз; - аутоиммунные заболевания с локализацией процесса в легких или в кишечнике; - IgA нефропатия. Причины снижения содержания IgA: - хронические заболевания (особенно респираторного и желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы);

- иммунодефициты; - туберкулез; - опухоли. Норма для IgM: 0,8 - 2,56 г/л Причины повышения содержания IgM:

- активация первичного иммунного ответа на антиген в первые 5 дней; - инфекции (острые или обострения хронических); - аутоиммунные заболевания, особенно ревматоидный артрит. Причины снижения содержания IgM: - иммунодефициты первичные и вторичные.

Норма для IgG: 8,0 - 16,8 г/л Причины повышения содержания IgG: - специфические антитела в иммунном ответе с 5-7 до 21 дня;

- иммунопатологические реакции на основе II и III типа повреждения тканей; - аутоиммунные заболевания.

Причины снижения содержания IgG: - иммунодефициты первичные и вторичные. Норма для IgE: 20 - 100 Ке/л Содержание Ig E повышается при различных видах аллергии, паразитозах.