Необходимые реактивы, не включенные в Набор для практикума

1. TRI Reagent (Ambion) / задача 1.

2. ДНК лигаза фага T4 с 10х буфером / задача 4.

3. Эндонуклеаза рестрикции BamHI (Сибэнзим) / задача 4.

4. Эндонуклеаза рестрикции HindIII с 10х буфером W и БСА (Сибэнзим) / задача 4.

5. Эндонуклеаза рестрикции SmaI / задача 4.

6. Компетентные клетки для химической трансформации (штамм XL1-Blue) / задача 4.

7. LB среда для культивирования бактерий, жидкая и агаризованная на чашках Петри / задачи 4, 5.

Внимание! Компетентные клетки и среда для культивирования бактерий могут быть приготовлены согласно стандартным протоколам, например, Гловер: «Клонирование ДНК, методы», 1988.

8. Наполненные колонки для очистки белков с His-концом

(6HisTag), например, Protino Ni-IDA 1000 (Macherey-Nagel), Protino Ni-TED 1000 (Macherey-Nagel) или колонки NiNTA-agarose (Qiagen) / задача 5.

9. Агароза / задачи 1-4.

10. ТАЕ буфер для гель-электрофореза / задачи 1-4.

11. Буфер для нанесения ДНК / задачи 1-4.

12. Бромистый этидий / задачи 1-4.

13. Маркеры молекулярных длин ДНК (1 kb DNA ladder) / задачи 1 - 4.

Внимание! В качестве маркера длин можно использовать любой образец ДНК с известной концентрацией и длиной фрагментов.

14. Дистиллированная вода / задачи 1-4.

15. Хлороформ / задача 1.

16. Изопропанол, 99% / задача 1.

17. 96% этиловый спирт / задачи 1, 4.

18. 80% этиловый спирт / задачи 1, 4.

Внимание! Готовят из 96% этилового спирта, добавляя дистиллированную воду.

19. Минеральное масло для молекулярно-биологических работ / задачи 1 - 4.

20. Ампициллин или карбенициллин (аптечный, сухой, во флаконах) / задачи 4, 5.

1.3.