2.3. Средства пробоподготовки

Вторая стадия, обработка пробы – это приспособление пробы к определению ее компонентов соответствующими методами и средствами. При обработке проб необходимым условием является сохранение естественных свойств объекта, особенно при исследовании тонких биохимических процессов.

Всю совокупность процедур пробоподготовки можно разделить на три группы в соответствии с частотой их применения и степенью влияния на специфические свойства объекта:

– общие (разбавление, дозирование и перемешивание);

– специальные (фракционирование с помощью центрифуг, электрофореза, дезагрегирование и фильтрация);

– частные (сжигание пробы, химическое окрашивание, фиксация).

Рассмотрим устройства для подготовки биопроб к анализу. Одним из важных факторов пробоподготовки является разделение биопроб на более или менее однородные компоненты. Это необходимо для обеспечения условий независимого анализа компонент с использованием ограниченного количества анализаторов.

Разделение биопроб на составляющие связано с большой затратой энергии. Наиболее распространенными устройствами, использующими силовые воздействия на биопробы, являются:

– центрифуги, использующие механическое воздействие;

– электрофоретические разделители, использующие электрическое воздействие;

– сорбционные разделители, использующие силы сорбционного воздействия.

Центрифуги используют центробежные силы для выделения из коллоидного раствора различных по плотности компонент. Плотность раствора меньше плотности компонент. Центрифуга позволяет быстро отделить форменные элементы крови от плазмы, выделить клеточные и бактериальные компоненты из биожидкости.

Медицинские препаративные центрифуги обрабатывают от 10 проб одновременно по 10-20 мл каждая. Они бывают трех видов в зависимости от степени разделения:

– со скоростью вращения до 10000 об/мин для разделения по фракциям белков;

– суперцентрифуги со скоростью вращения 40000-50000 об/мин для разделения по фракциям полимерных молекул;

– ультрацентрифуги со скоростью вращения 70-100000 об/мин для разделения клеточных структур.

Электрофоретическая аппаратура предназначена для разделения многокомпонентной смеси на фракции, отличающиеся скоростью перемещения компонент под действием электрического тока. При достаточной простоте обеспечивает тонкое разделение белков.

Сорбционное разделение осуществляется на специальных колонках с жидкими или твердыми сорбентами высокой чистоты. Позволяет быстро и качественно разделить жидкие и газовые среды.