Определение кальпротектина в кале

Исследование проводилось на базе детской городской клинической больницы № 5 им. Н.Ф. Филатова.

Данный иммунный метод предназначен для количественного определения кальпротектина в образцах человеческого кала.

Принцип метода состоит в следующем: высокоспецифичные моноклональные «захватывающие» антитела (mAb) к кальпротектину сорбированы на тестовой мембране, вторые моноклональные «выявляющие» антитела, конъюгированные с коллоидным золотом, депонированы в специальной области (область конъюгата), откуда они высвобождаются в реакционную систему после внесения разведённого экстракта образца кала. Кальпротектин/антикальпротектин конъюгат с золотом связывается с антителами к кальпротектину, сорбированными на тестовой мембране

(тестовая линия), и оставшиеся свободные антитела к кальпротектину, конъюгированные с золотом, связываются с козьими антителами к антителам мыши, сорбированными на тестовой мембране (контрольная полоса). Интенсивность окрашивания тестовой и контрольной линий количественно измеряется с помощью экспресс-анализатора Quantum Blue^® (Buhlmann, Швейцария).

Если тестовая линия не появляется через 12 минут периода инкубации, то концентрация кальпротектина, присутствующего в образце, ниже предела чувствительности метода. Если тестовая линия появляется через 12 минут периода инкубации, то уровень кальпротектина, присутствующего в образце, может быть количественно рассчитан с помощью экспресс-анализатора Quantum Blue^®. Если появляется только тестовая полоса через 12 минут периода инкубации, то результат тестирования признаётся недостоверным и анализ должен быть повторен с использованием другого тест-картриджа. Если ни одной полосы, ни контрольной, ни тестовой, не появляется через 12 минут инкубации, то результат тестирования недостоверен и анализ должен быть повторен с использованием другого тест- картриджа.

Так как экспресс-анализатор Quantum Blue^®позволяет выполнять количественное определение тестовой и контрольной линий, в анализ включена дополнительная проверка наличия контрольной линии.

2.3.