ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время не вызывает сомнений, что активация свободнорадикальных процессов занимает существенное место в генезе и течении многих заболеваний, в том числе и злокачественной патологии.

Среди факторов, ведущих к возникновению РМЖ, нередко называют окислительный стресс, протекающий на организменном уровне. В результате окислительного стресса накапливаются токсичные продукты перекисного окисления липидов, что является одной из причин разбалансировки регуляции гомеостаза, приводящей к серьезным метаболическим нарушениям, изменениям иммунологического статуса, сдвигам функционального состояния различных систем организма (Kohen R., Niska А., 2002). Из данных литературы известно, что свободные радикалы являются участниками многих внут- риопухолевых событий. Активированные кислородные метаболиты принимают участие в прогрессии опухолевых клеток, поддерживая рост опухоли, ее инвазивность и метастатический потенциал (Das U.N., 2002; Ray G., Husain S.A., 2002). В ткани молочной железы предшественниками свободных радикалов, по-видимому, являются стероидные гормоны, которые в процессе тканевого метаболизма превращаются в хиноны и гидрохиноны, обладающие, генотоксическим эффектом (Берштейн Л.М., 2002).

Развитие злокачественных новообразований приводит к значительным изменениям в липидном составе и интенсивности процессов ПОЛ в опухоли и на уровне организма в целом. Отмечено, что такие изменения носят фазный характер и зависят от характеристик опухоли и состояния организма (Зенков Н.К.

Для оценки распространенности опухолевого процесса и эффективности химиотерапии в крови больных РМЖ был исследован ряд показателей свободнорадикальных процессов. Одним из наиболее адекватных методов изучения ПОЛ является биофизический способ определения интенсивности свечения биологических проб (мы использовали плазму крови) - перекись водорода-люминолзависимая хемилюминесценция. Квантовый выход хемилюминесценции характеризует скорость цепного свободнорадикального окисления липопротеидных комплексов и позволяет количественно судить о содержании таких радикалов, как (¼* и ОН*, с которыми связаны начальные звенья цепей ПОЛ.

Более поздним этапам процессов пероксидации липидов соответствует накопление промежуточных или конечных продуктов, одним из которых является МДА. Концентрация указанного вещества, определяемая нами тио- барбитуровым методом, отражает, во-первых, интенсивность протекания ПОЛ, а во-вторых, дает дополнительную информацию о состоянии окисли- тельно-антиокислительной системы крови.

Поскольку свободнорадикальное ПОЛ в организме сопряжено с функционированием антиоксидантной системы, наше внимание привлекло исследование некоторых компонентов этой системы. Центральным звеном антирадикальной защиты является СОД, инактивирующая O₂* с образованием перекиси водорода, которая разрушается каталазой, ферментом, тесно взаимосвязанным в своей работе с СОД. Расчет коэффициента отношения активности СОД к активности каталазы (Ксод/kat) позволил, на наш взгляд, оценить сбалансированность работы каскада этих ферментов. Помимо СОД и каталазы мы исследовали активность белкового антиоксиданта плазмы крови церулоплазмина, являющегося полифункциональным ингибитором относительно большого количества свободных радикалов (таких как, (V, ОН*, гипогалоидов).

Установлено, что нарушение равновесия в системе ПОЛ - антиоксиданты отражается, прежде всего, на функционировании клеточных мембран. Состояние плазматических мембран оценивали по нескольким показателям. Ведущая роль в регуляции многих процессов, протекающих в мембранах, принадлежит текучести. Реагируя на изменения во внешней и внутренней среде, текучесть мембран оказывает влияние на активность мембраносвязанных белков: ферментов, рецепторов, каналообразующих белков (Извекова В.А., 1991; Бурлакова Е.Б., 1998). Кроме текучести липидного бислоя и бе- лок-липидных контактов мембран нами была исследована полярность окружения зонда пирена в мембране, а также погруженность белков в липидный бислой.

По утверждению Е.Б. Бурлаковой (1998), в организме существует система регуляции клеточного метаболизма, основанная на связи между скоростью перекисного окисления фосфолипидов мембран, с одной стороны, и обновлением их состава - с другой. Основными компонентами этой системы являются: скорость генерации перекисных радикалов, активность антиоксидантов, состав и структура мембранных липидов, характеризующиеся в значительной степени текучестью.

Руководствуясь в своем исследовании этим постулатом, мы сочли необходимым изучить звенья всех компонентов указанной системы.

В ходе работы была исследована кровь 122 больных раком молочной железы, у 85 из которых были признаки местнораспростаненного процесса, у 37 — генерализованного. После проведения первого курса аутоплазмо- и ау- томиелохимиотерапии были обследованы 66 больных.

Для выявления возможной зависимости показателей, характеризующих уровень свободнорадикальных процессов, активность антиоксидантной системы и состояние плазматических мембран от степени распространенности злокачественного процесса нами была исследована кровь 24 больных местнораспространенным РМЖ (TV₄N_b2M₀-I, где Mi - метастазы в надключичные лимфоузлы на стороне поражения) и 15 больных генерализованным РМЖ (Т _ЛЮбое N _ЛЮбое Mi), где Mi -метастазы в кости, печень, легкие, плевру, мягкие ткани с массивным поражением отдаленных лимфоузлов.

Изучение интенсивности свободнорадикальных процессов в крови больных местнораспространенным и генерализованным РМЖ по изменению светосуммы хемилюминесценции плазмы крови в системе перекись водорода - люминол выявило снижение уровня свободных радикалов при прогрессировании опухолевого процесса. Низкая интенсивность XJI по сравнению со значениями у здоровых женщин имела место в обеих группах больных, при этом уровень хемилюминесценции в группе с генерализованным РМЖ был достоверно ниже (на 37,7%), чем в группе с местнораспространенной формой заболевания.

Интересно сопоставить полученные нами результаты с данными Ф.К. Шарипова и Г.В. Киреева (2003), в работе которых представлены результаты хемилюминесцентного исследования свободнорадикального окисления липидов сыворотки крови больных со злокачественными и доброкачественными новообразованиями головного мозга, катализируемого ионами двухвалентного железа. У больных с доброкачественными опухолями гипофиза отмечено статистически достоверное снижение параметров ХЛ по сравнению с таковыми у здоровых лиц, а при злокачественных новообразованиях головного мозга они были еще более низкими. Авторы полагают, что обнаруженные изменения говорят в пользу того, что степень катаплазии оказывает существенное влияние на параметры свечения.

На снижение уровня переписного окисления липидов при прогрессировании опухолевого процесса указывают также данные о более низком содержании вторичного продукта ПОЛ - МДА в плазме крови больных генерализованным РМЖ по сравнению с местнораспространенным процессом. Так как плазма крови является компонентом общей внутренней среды организма, ее состав и содержание в ней продуктов ПОЛ (в нашем случае МДА) интегрально отражает совокупность процессов, протекающих в целостном организме. Содержание МДА в плазме крови больных генерализованным РМЖ было на 11,6% ниже, чем у больных местнораспространенным РМЖ, однако достоверно не отличалось от уровня у здоровых женщин, тогда как при местнораспространенном процессе этот показатель превышал норму на 23,4%.

Полученные нами результаты не противоречат литературным данным. Так, при исследовании показателей ПОЛ и антиоксидантной системы тромбоцитов больных раком яичников, уровень МДА при I-II стадии процесса был повышен в 2,8 раза по сравнению с нормой, а при увеличении распространенности злокачественного процесса содержание МДА снижалось (Горожанская Э.Г. и соавт., 2003).

Обнаруженное нами снижение уровня ПОЛ по мере увеличения распространенности опухолевого процесса, возможно, связано с одновременным повышением активности СОД и каталазы. Известно, что каталаза способствует разложению перекиси водорода, образующейся в реакции дисмутации Ог под действием СОД. Нами было показано, что при генерализации РМЖ эти два фермента, участвующие в обезвреживании активных форм кислорода в начальной стадии процесса ПОЛ, работают сопряженно, и их активность меняется однонаправлено, поэтому повышение СОД и каталазы на этом этапе окислительного стресса обеспечивает снижение уровня свободных радикалов и продуктов ПОЛ. Так, при генерализованном РМЖ уровень СОД в эритроцитах превышал значение соответствующего показателя при местнораспространенном процессе на 160,7%, активность каталазы в эритроцитах - на 38,8%, в лимфоцитах - на 45,8%, в плазме крови - на 34,9% соответственно, при чем все изменения были статистически достоверными (р