Методы исследования

Определение групп крови:

Системы групп крови ABO

Группы крови по системам ABO определялись по общепринятой методике путем титрования эритроцитарных антигенов в реакции гемагглютинации с выявлением четырех фенотипов: 0(1); A(II); B(III); AB(IV).

Резус принадлежность крови определяли в реакции конглютинации с добавлением полиглюкина 33% пробирочным методом, используя стандартные иизоиммунные сыворотки антирезус. Для определения антигенов системы ABO и Rh и резус(Б) применялись сыворотки местного производства.

Определение гематологических параметров

Для исследования брали кровь из пальца натощак. Подсчет лейкоцитов, тромбоцитов, эритроцитов, определение гемоглобина, гематокрита, 'средней концентрации гемоглобина в одном эритроците (MCH) производили на автоматическом гематологическом анализаторе «Coulter MicroDiff 18» (Франция). В части исследований подсчет количества лейкоцитов, тромбоцитов производили визуально в камере Горясова на бинокулярном микроскопе «БИМАМ». Определение гемоглобина проводилось унифицированным гемоглобинцианидным методом. Лейкоцитарную формулу подсчитывали в окрашенных мазках крови с использованием лабораторного одиннадцатиклавишного счетчика СЛ-1. Скорость оседания эритроцитов проводили по унифицированному микрометоду Панченкова.

Определение параметров системы гемостаза.

Для исследования системы гемостаза венозную кровь получали из локтевой вены широкой иглой в стеклянные пробирки, кровь немедленно смешивали с 3,8 % раствором цитрата натрия в соотношении 9:1- и центрифугировали при 3000-4000 об/мин в течении 15 мин при комнатной температуре (+18-25). Полученную бедную эритроцитами плазму исследовали в течение 2 часов. Определяли следующие параметры:

1. Активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ)

2. Протромбиновое время (ПВ) с определением по унифицированному методу (1974 г).

3. Тромбиновое время (ТВ)

4. Концентрация фибриногена в плазме, определялась по Рутбергу

5. Уровень растворимого фибрина в плазме — орто-фенантролиновым тестом (О-ФТ) по В.А. Елыкомову и А.П. Момоту (1987).

Все перечисленные методики выполнялись с использованием наборов фирмы «Технология-Стандарт».

Определение биохимических параметров крови.

Для определения биохимических параметров кровь бралась утром натощак из локтевой вены в чистую сухую пробирку. Затем после образования сгустка центрифугировали 5 минут при 2000 об/мин при комнатной температуре. Затем полученная сыворотка использовалась для определения биохимических параметров. Определение глюкозы производили на анализаторе глюкозы ЭКСАН-Г. Определение ионов натрия и калия производили на иономере ЭЦ-59. Определение мочевины производили по унифицированной методике по цветной реакции с диацетиламиномоноксимом, с использованием наборов «Лахема» (Чехия).Определение тимоловой пробы производилось унифицированным методом, с использованием наборов фирмы PLIVA-Lachema (Чехия). Определение билирубина унифицированным методом по диазореакции в присутствии акселератора (метод Ендрассика-Клеггорна-Грофа), с использованием реактивов фирмы VitaL-Diagnostics.

Определение степени онкориска, общего белка, белковых фракций, холестерина и липидных компонентов сыворотки крови проводили на акустическом приборе «БИОМ» (г. Н.Новгород).

Метод определения основан на использовании акустических принципов и заключается в измерении акустических характеристик сыворотки крови и других биологических жидкостей при помощи анализа параметров акустического резонатора с биологической средой.

Кровь у пациента забиралась утром натощак из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 5 мл и оставлялась при комнатной температуре на 1 час для образования сгустка крови, затем центрифугировалась при 3000 об/мин в течение 5 мин.

Затем полученная сыворотка делилась на 2 части, одна из которых подвергалась обработке с целью получения модифицированной сыворотки.

Градация на 6 степеней риска, определение общего белка, белковых фракций, нарушения липидного обмена и фракции липидов программа прибора «БИОМ» выполняет на основании измерения акустических характеристик сыворотки крови и модифицированной сыворотки с учетом возраста и пола пациента, используя критерии, хранящиеся в ПЗУ микрокомпьютера прибора «БИОМ».

Оценка степени онкориска проводилась по следующей шкале:

1,2 — отсутствие онкориска;

3 - низкая степень риска;

4 - высокая степень онкориска;

5- очень высокая степень риска;

6- онкологические больные.

При разделении белков крови на фракции акустическим методом определяли: альбумин, альфаі-глобулин, альфа2-глобулин, бета-глобулин, гамма-глобулин, а также соотношение альбуминов и глобулина. Состав фракции белков, выделяемых в биологических жидкостях, в значительной степени зависит от применяемого метода.

При использовании акустического метода определились следующие фракции липидов: общий холестерин, А-холестерин, к-атерогенности, триглицериды, Б-липопротеиды, липопротеиды низкой плотности (ЛНП), липопротеиды очень низкой плотности (ЛП ОНП).

2.3