3 Проведение исследований молока (секрета) на наличие возбудителей мастита
3.1 Пробы молока на наличие возбудителей мастита исследуют сразу после доставки их в лабораторию. Оставшееся молоко хранят при температуре не выше 6°С до конца анализа.
3.2 Посев молока проводят на МПА с 5% цитратной крови крупного рогатого окота (рецепт 1) и на дифференциально-диагностические среды с целью выделения золотистого стафилококка, стрептококков различных серологических групп, эшерихий, синегнойной палочки, грибов рода Candida.
3.3 При первичном обследовании стада, особенно с большим поголовьем или с большим процентом выделения животных с раздражениями вымени, рекомендуется взятые с соблюдением правил асептики образцы молока из реагирующих четвертей вымени высевать на мясопептонный агар с 5% крови крупного рогатого скота. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37°С в аэробных условиях в течение 24 часов. В случае отсутствия роста посевы выдерживают еще 24-48 часов.
3.4 Для идентификации выросших культур изучают их культуральные свойства. Крупные выпуклые колонии, вне зависимости от наличия зоны гемолиза, ориентировочно относят к стафилококкам; мелкие росинчатые - к стрептококкам; серые круглые блестящие плоские колонии обычно указывают на рост бактерий группы кишечной палочки. Появление колоний с зеленым оттенком дает основание предполагать наличие синегнойной палочки.
Слизистые гладкие или матовые колонии характерны для споровой микрофлоры, что свидетельствует о загрязнении молока при отборе пробы.
3.5 Из колоний, одинаковых по морфологическим свойствам, делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют.
При исследовании молока на наличие возбудителей мастита могут быть использованы также элективные среды: для выделения золотистого стафилококка - солевой агар, для стрептококков - среда Карташовой, для бактерий группы кишечной палочки - среда КОДА, для псевдомонад - МПБ, для грибов рода Candida - среда элективная дифференциально-диагностическая.
3.6 С целью исключения выделения случайных микроорганизмов, исследование образцов молока повторяют с применением элективных сред.
К возбудителям мастита относят бактерии с идентичными культуральным свойствами, которые выделены при повторном исследовании.
3.7 Допускается также производить первичный высев молока при обследовании стад на мастит на вышеуказанные среды в два этапа: в начале на среды для выделения золотистого стафилококка и стрептококков, так как им принадлежит преимущественная poль при возникновении мастита микробной этиологии. В случае получения отрицательных результатов, пробы высевают через 24 часа на другие питательные среды.