Последовательность операций при приведении микроскопа в рабочее положение
- В рабочее положение ставят объектив х10, конденсор поднимают, диафрагму конденсора открывают полностью, зеркалу придают положение, обеспечивающее равномерное освещение поля зрения.
Используют плоское зеркало.- На предметный столик помещают предметное стекло с объектом, фокусируют объектив на объекте и добиваются достаточно хорошего изображения за счет положении конденсора и раскрытия апертурной диафрагмы.
Поворотом револьвера устанавливают необходимый объектив. Если это иммерсионный объектив, то на стекло с препаратом наносят каплю иммерсионного масла. Объектив опускают осторожно, сначала при помощи макровинта до соприкосновения с маслом, затем проводят микровинтом фокусировку, глядя в окуляр. После того, как появилось изображение, настраивают освещение, как описано выше.
При работе с высокоразрешающими и аналогичными компенсационными окулярами желательно устанавливать оптимальное освещение, особенно это важно, если предполагается фотографирование объекта. При обычном освещении объект освещен неравномерно из-за того, что в плоскости объекта находится изображение источника света, свечение которого реально равномерным не бывает. В результате установки освещения, этот недостаток удается устранить.
При использовании иммерсионного объектива освещение устанавливают следующим образом.
- На зеркале под конденсором размещают листок белой бумаги. Предварительно лампу осветителя располагают таким образом, чтобы изображение нити заполняло отверстие конденсора.
- Полностью открывают все диафрагмы. Если источник света имеет спиральную нить, то под конденсором помещают матовое стекло.
- На конденсор и нижнюю поверхность предметного стекла наносят иммерсионное масло и поднимают конденсор до слияния капель масла.
- В рабочее положение ставят малый объектив, фокусируют его на объекте, снимают окуляр, смотря на заднюю линзу объектива, придают зеркалу и конденсору положение, обеспечивающее максимальное центрирование и равномерное освещение.
- Вставляют окуляр и находят в препарате интересующий участок.
- На стекло наносят масло, заменяют объектив на иммерсионный и проводят фокусировку.
- Сужают отверстие диафрагмы и фокусируют его край при помощи конденсора в плоскости препарата. Затем отверстие диафрагмы лампы приводят в соответствие с краем поля зрения.
- Удаляют окуляр (не менее х12, х15) и, глядя через тубус, уменьшают апертурную диафрагму конденсора до исчезновения бликов, но не более чем на 1/10 диаметра задней линзы объектива.
- Вставляют окуляр и соответствующие светофильтры для микроскопии или фотографирования.
Возможные дефекты при световой микроскопии, их причины и устранение представлены в таблице 1.
Таблица 1
Распространенные неисправности, встречающиеся в световой микроскопии, их причины и способы устранения
| Неисправность | Возможные причины | Способы устранения |
| Макровинт ходит слишком тяжело | Неправильная регулировка хода | Для многих видов штативов регулировка осуществляется легко (обычно перемещением двух регулировочных головок в противоположных направлениях) |
| Загрязнение реечного механизма | Почистить и нанести новую смазку | |
| Тубус или предметный столик самопроизвольно опускается под собственным весом (изображение расфокусируется) | Неправильно отрегулировано передача и (или) слишком жидкая смазка | То же |
| Неисправная система наводки на фокус | Действовать как в случае первой неисправности | |
| Микровинт не движется в одну из сторон | Микровинт находится в крайнем положении | Установить при помощи револьверной насадки объектив х10; поместить микровинт в среднее положение и вновь вывести объектив в фокус с помощью макровинта |
| Расфокусировка в результате незначительного движения микровинта (особенно при работе с иммерсионными объективами) | Объективы плохо ввинчены в револьверную насадку | Ввинтить объективы в револьверную насадку |
| К объективу пристало липкое из-за нанесенного на него масло покровное стекло | Применять менее вязкое иммерсионное масло; прочнее прижимать образец | |
| Неясное пятнистое изображение | Грязь или смазка на окуляре (пятна движутся при вращении окуляра в тубусе) или объективе; загрязнение покровного стекла (пятна движутся при смещении образца) или любой поверхности в системе освещения | Очистить соответствующие поверхности |
| Четко сфокусированные пятна или точки, смещающиеся и исчезающие при перемещении конденсора вверх и вниз | Загрязнение источника света или рассеивание экрана перед ним, если условия освещения критические, загрязнение крышки встроенного осветителя или прилежащего к нему светофильтра при освещении | См. выше; при невозможности достичь загрязненной поверхности с целью ее очистки слегка изменить фокусировку конденсора |
| Неясное изображение, которое нельзя хорошо сфокусировать | Не та среда перед объективом (масло вместо воздуха, воздух вместо масла, пузырьки воздуха в масле); загрязнение передней линзы объектива, через которую проходит свет | Заменить среду; удалить заполнение |
| Слишком толстое покровное стекло, чрезмерно толстый слой среды, в которую заключен препарат | Применить объектив с корректирующей втулкой или иммерсионный объектив | |
| Неравномерно расположенные остатки иммерсионного масла на покровном стекле, если используется безыммерсионный объектив с большим увеличением | Очистить сухой тканью или бумагой; избегать ксилола, т.к. он может размягчить или растворить среду, в которую заключен препарат | |
| Предметное стекло на предметном столике перевернуто препаратом вниз (только в случае объективов с большим увеличением) | Перевернуть предметное стекло; убедиться в том, что метка с обозначением препарата не наклеена на противоположную сторону | |
| Поле зрения освещено не полностью | Световой путь частично заслонен держателем светофильтра. Объектив не зафиксирован в нужном положении. Конденсор (или регуляторные линзы) не находятся на описи | Способ устранения очевиден- |
Еще по теме Последовательность операций при приведении микроскопа в рабочее положение:
- МЕТОДЫ И СИСТЕМЫ ВИРТУАЛЬНОЙ РЕАЛЬНОСТИ В НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
- ОШИБКИ ПРИ УКЛАДКЕ БОЛЬНОГО НА ОПЕРАЦИОННЫЙ СТОЛ
- Глава 4 ОШИБКИ ПРИ МАНИПУЛЯЦИЯХ НА ПОКРОВНЫХ ТКАНЯХ И НАРУЖНЫХ МЫШЦАХ ГЛАЗНОГО ЯБЛОКА
- НЕКОГОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ МИКРОХИРУРГИЧЕСКИХ МАНИПУЛЯЦИЙ HA ТКАНЯХ ГЛАЗНОГО ЯБЛОКА
- Манипуляции на фиброзной капсуле глаза
- Последовательность операций при приведении микроскопа в рабочее положение