Исследование механизмов действия антибиотиков с применением D20
Применение тяжелой воды в качестве среды в ряде случаев способствовало проведению изучения механизмов антибиотического взаимодействия, например, множественной устойчивости к р-лактамазным антибиотикам.
Такая устойчивость обычно ассоциируется с 7п2+-зависимыми лактамазами, обнаруживаемыми в различных клинических изолятах, в том числе в бактериях Bacteroides fragilis — самых распространенных источниках гнойных хирургических инфекций. Кинетические исследования 7п2+-зависимого растворимого фермента с использованием нитроце- фина в качестве субстрата не обнаружили ионизируемых групп, вовлеченных в катализ. Вместе с тем использование тяжелой воды позволило зафиксировать кинетическую важность участия в реакции стадии переноса протона. Эти исследования также обнаружили накопление фермент- связанного интермедиата реакции. Таким образом, результаты, полученные с использованием тяжелой воды, обеспечили основу для исходного кинетического описания схемы гидролиза, приемлемой для нитроцефина.Рассмотрим еще один пример сравнительно простого, но изящного метода, примененного для установления наличия ферментативной активности. Протонированный цитозинин (нуклеиновую составляющую антибиотика бластицидина С) и пиридоксальфосфат проинкубировали вместе в бесклеточном экстракте биомассы Streptomyces griseochromogenes, выращенной в В2О-среде. Было зафиксировано включение атомов дейтерия в Н4' и Н2' позиции молекулы цитозинина. В контрольных экспериментах — при кипячении смеси или если в смеси отсутствовали клеточные экстракты — включение дейтерия не наблюдали. Это четко указывало на присутствие в экстракте биомассы Str. griseochromogenes таутомеразной активности, участвующей в превращении цитозил- глюкуроновой кислоты в бластицидин С и, соответственно, подтверждало роль цитозинина как интермедиата в данной ветви биосинтеза антибиотика.
3.3.
Еще по теме Исследование механизмов действия антибиотиков с применением D20:
- 1. Применение, механизм действия тилозина
- Общая характеристика социальной защиты и её правовых механизмов для лиц в клинических исследованиях лекарственных препаратов для медицинского применения
- Механизм токсического действия
- Механизм действия.
- Авермектины: биологическое действие и применение
- Механизм токсического действия
- Механизмы лечебного действия групповой психотерапии.
- Механизм токсического действия
- Механизм токсического действия
- Механизм действия НПВП