Механизм регуляции гормональной чувствительности клеток рака молочной железы в условиях хронической гипоксии

Стефанова Л.Б., Андреева О.Е., Красильников М.А.

НИИ канцерогенеза РОНЦ им.Н.Н.Блохина РАМН, г.Москва

Цель работы: Исследование механизма адаптации клеток рака молочной железы к гипоксии и изучение внутриклеточных сигнальных путей, регулирующих уровень гормональной зависимости рака молочной железы в условиях гипоксии.

Материал и методы: Эксперименты проводились in vitro на линии эстроген-зависимых клеток рака молочной человека MCF-7. Транскрипционную активность рецептора эстрогенов (ER) определяли методом репортерного анализа с использованием плазмиды ERE-TK-LUC, содержавшей ген-репортер люциферазы под контролем эстроген-чувствительного элемента.

Результаты: Кратковременная гипоксия приводит к снижению транскрипционной активности ER в клетках MCF-7. Длительное культивирование клеток в условиях гипоксии сопровождается восстановлением транскрипционной активности рецептора, причем в итоге активность рецептора оказывается даже выше исходной. Аналогичная тенденция была обнаружена при изучении чувствительности клеток MCF-7 к рост-стимулирующему действию эстрогенов в условиях гипоксии - некоторое снижение гормонального ответа клеток при кратковременной гипоксии и восстановление гормональной чувствительности в условиях хронической гипоксии. Для дальнейшего изучения механизма восстановление гормональной чувствительности клеток был проведен анализ транскрипционной активности NF-kB - одного из ключевых антиапоптотических белков, одновременно являющегося негативным регулятором ER. Мы показали, что хроническая гипоксия приводит к снижению активности NF-kB в клетках MCF-7, и в экспериментах по специфическому подавлению NF-kB с помощью короткой интерферирующей РНК продемонстрировали, что подавление NF-kB сопровождается активацией ER.

Выводы: В целом полученные результаты свидетельствуют о возможности восстановления гормональной чувствительности опухолей молочной железы в условиях хронической гипоксии и демонстрируют, что специфическое подавление NF-kB может явиться одним из путей увеличения гормональной зависимости опухолевых клеток.