ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ НЕМАТОД И ИХ ЯИЦ

Нематод получают после дегельминтизации (аскарида, ан- килостомиды, острица) или от животных (аскарида и власоглав— от свиней). Фиксируют жидкостью Барбагалло (3% раствор формалина на физиологическом растворе).

Из мелких нематод (остриц, власоглавов, анкилостомид и др.), а также из личинок нематод готовят постоянные микропрепараты по Пренделю. Фиксированных в жидкости Барбагалло нематод последовательно проводят через различные смеси спирта и глицерина (в каждой смеси выдерживают 24 ч):

1 смесь —20 мл 40° спирта+ 2 мл глицерина

2 » — 20 » 50° » + 5 » »

3 » — 20 » 60° » + 6 » »

4 » —20 » 70° » + 10 » »

После суточного пребывания в последней смеси нематод оставляют в этой же жидкости, но в открытом широком сосуде при 37°; вследствие испарения спирта объем жидкости должен уменьшиться наполовину и нематоды окажутся в чистом глицерине. Червей переносят на предметное стекло, избыток глицерина удаляют фильтровальной бумагой и препарат заключают под покровное стекло в глицерин-желатину, расплавленную на водяной бане. Ha покровное стекло ставят грузик до затвердевания смеси. Края покровного стекла через несколько дней окантовывают валиком канадского бальзама, чтобы препарат не высыхал.

Кал с большим содержанием яиц нематод можно консервировать и хранить длительное время (см. «Цестоды»). Только кал с яйцами аскариды и власоглава следует нагреть до 60°, чтобы они не развивались до инвазионной личинки.

Для приготовления микропрепаратов яйца нематод получают из свежего кала флотационным методом (см. «Цестоды») и из взрослых гельминтов после дегельминтизации (аскариды, анкилостомиды). Можно готовить постоянные препараты яиц свиной аскариды и свиного или овечьего власоглава.

Чтобы яйца приобрели естественную окраску, их помещают на несколько часов в фекалии, а затем извлекают флотацией в солевом растворе. Яйца остриц получают соскобом с периа- нальных складок.

Яйца нематод заключают в глицерин-желатину, как и яйца плоских червей. Можно готовить препараты яиц по Пренделю, как и препараты взрослых гельминтов. Приготовление препаратов яиц анкилостомид производится так же, как яиц карликового цепня.

Трихинелл легко культивировать в лаборатории на белых мышах, заражая животных личинками (5—10 личинок на 1 г живого веса). Личинок трихинелл выделяют из мышц, переваривая их в искусственном желудочном соке. Из. личинок можно приготовить микроскопические іпрепаратьі, подкрашивая гематоксилином, как трематод. При фиксации живые личинки остаются в скрученном состоянии, чтобы они развернулись, их нужно убить нагреванием на водяной бане до 60°. Половозрелых трихинелл получают из тонкого кишечника интенсивно зараженных белых мышей через 6—7 дней после заражения. Кишечник разрезают ножницами вдоль, отмывают от содержимого и помещают в чашку Петри с небольшим количеством физиологического раствора в термостат при 37°. Через 2 ч трихинеллы выходят в жидкость. После фиксации из них готовят постоянные микроскопические препараты. Их можно подкрашивать кармином или гематоксилином.

Для приготовления микроскопических препаратов мышц с инкапсулированными личинками трихинелл пользуются разными методами. Можно готовитьокрашенныегистологическиепре- параты. Неокрашенные препараты готовят следующимобразом. Срезы из свежих мышц раздавливают в компрессории, подсушивают фильтровальной бумагой, помещают на 3—5 мин в ксилол, вторично зажимают между стеклами, после чего заключают в бальзам под покровное стекло. При такой методике личинки и капсулы бывают хорошо заметны. Раздавленные в компрессории срезы мышц можно заключать сразу же в глицерин-желатину под покровное стекло, на которое ставится грузик. Срезы из мышц, консервированные в формалине или 70° спирте, помещают в 50% раствор глицерина для просветления и выдерживают от нескольких часов до суток, далее поступают таким же образом. Однако в неокрашенных препаратах с глицерин-желатиной трихинеллы со временем становятся прозрачными и плохо различимыми, поэтому лучше готовить окрашенные препараты.